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丙酮酸激酶(PK)测试盒的组成
(测血清、血浆、组织)
一、测定原理:
丙酮酸激酶(pyruvate kinase. PK)在 ADP 存在下可
催化 PEP 产生丙酮酸,丙酮酸再由 LDH 将其转变为乳
酸,同时将 NADH 变为 NAD。
二、试剂组成与配制:(50 管/48 样)
试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×2 支,-20℃保存,每支用时加双蒸水
1.4mL,用不完放-20℃以下保存 3~7 天。(如
果你的样本量少,可以将配好的 1.4mL 再分
成 2~3 管放-20℃以下保存,每次取一管用,
以免反复冻融)
试剂三:液体×4 支,4℃保存,不可冷冻,用不完的仍
放 4~8℃保存。
试剂四:粉剂×4 支,-20℃保存,用时每支加双蒸水
320µL,用不完放-20℃以下保存。
试剂五:粉剂×4 支,-20℃保存,用时每支加双蒸水
650µL,用不完放-20℃以下保存。
三、操作过程:
1、样本前处理:
①、血清(浆)样本:直接检测。
②、组织样本:准确称取组织重量按重量(g)
:体积(mL)
=1:9 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰
水浴条件下机械匀浆,制成 10%匀浆,2500
转/分,离心 10 分钟,取上清再用生理盐水
稀释成适当浓度匀浆上清待测(请做 1~2
个浓度的预试验)。(取得的上清液需测蛋白
浓度,蛋白定量试剂盒本所有售)
2、操作表:
丙酮酸激酶(PK)测试盒的组成