明胶酶谱检测试剂盒

明胶酶谱检测试剂盒

简介：

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以无活性的酶原形式分泌，活化后能够降解细胞外基质的胶原蛋白，又称胶原酶。通过影响细胞外基质，胶原酶参与胚胎发育、形态发生、组织重塑等过程，并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。血浆与组织中的MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程，其在诊断和治疗中的意义日益受到重视。

明胶酶谱法是一种新型的蛋白质分析方法，它可以提供准确的蛋白质质量分析和分子量分析结果。明胶酶谱法可以快速有效地测定蛋白质中的氨基酸和糖基化激酶的活性。这种方法通

过使用蛋白质，核酸和其他复合物构成的聚合物，结合相关的酶诱发反应，来分析蛋白质的质量和分子量。这些复合物可以在单独的氨基酸片段中用来测量激酶反应，从而识别活性位点，反映了蛋白质质量和分子量分析的结果。

明胶酶谱法的原理是基于胶质酶结合物，它由多种蛋白质，核酸和其他复合物组成，使用酶

诱发反应来分析蛋白质的质量和分子量。该方法由激酶和聚合物组成，它们分别催化了激酶和聚合物的反应，从而产生了激酶的活性。此外，该方法还能够测量氨基酸片段的活性，这将有助于评估蛋白质的质量和分子量。

检测目的:

本试剂盒用于检测MMP-2、MMP-9 酶谱及活性（Detect MMP2 and MMP9 as low as 1nM）

检测原理：

本试剂盒采用酶谱法(Zymography)检测MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一种广为使用的、基于SDS-PAGE 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1 nM，高于ELISA方法，其基本原理1和程序是：制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE 凝胶，含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer 孵育，凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮区域，从而能同时指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶谱)及活性。本试剂盒提供MMP-2、MMP-9 特异蛋白底物及酶学反应缓冲液，可检测少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶谱及活性，检测灵敏度~1nM。试剂盒可进行50次标准小胶检测，如果小胶加样孔为10~15个，则总计可检测500~750个样品。

试剂盒组成与储存:

A. 2 x SDS-PAGE non-reducing buffer 1.5 ml, -20℃保存

B.10 x Substrate G, 50 ml,-20℃保存:

C.10 x Buffer A,50 ml,4℃保存,使用时用蒸馏水稀释

D.10 x Buffer B,50 ml,4 ℃保存,使用时用蒸馏水稀释:

E.SDS-PAGE 凝胶蛋白质考马斯亮蓝染色液,50ml,4℃保存

注意事项

1.10 mM EDTA能够抑制MMP活性

2.凝胶干燥:可使用聚丙烯-酰胺凝胶干胶装置室温快速干燥凝胶，作为记录保留。

3.本试剂盒仅供科研实验使用，不得用于食用、临床医疗等其它用途。

4.实验操作中，请穿戴好实验服、防护口置和一次性实验手套，避免直接接触，严禁入口。

使用该试剂盒发表的文章:

本产品仅供科研，不得用于临床，医疗，食用等

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