总胆固醇(T-CHO)测试盒性能指标

总胆固醇(T-CHO)测试盒性能指标

检测原理：

性能指标：

1、试剂空白管吸光度≤0.100（光径 0.5cm）。

2、线性：0～19.39mmol/L 范围内，r2＞0.995。

3、精密度：CV≤3%，批间相对极差≤5%。

4、稳定性：原装试剂盒在 2℃～8℃避光保存，有效期为 12个月。开启后 2℃～8℃避光保存，可稳定 3 个月。

所需仪器耗材及试剂： 含 500nm 波长的酶标仪及 96 孔板，37℃水浴锅或恒温 箱，台式低速离心机，各种规格移液器，蒸馏水，涡旋混匀 器，试管或离心管。

操作过程: 

1、样本处理: 

①、血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀 释后测定。

②、培养液样本：吸取培养液，1000 转/分，离心 10 分 钟，取上清测定。[注]：一般建议细胞密度在 100 万个/mL 以上。 

③、组织样本：准确称取组织重量，按重量(g):体积 (mL)=1:9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介质，冰水 浴条件下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取 上清液待测。[注]:如组织样本均为非高脂样本，匀 浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生 理盐水进行匀浆提取；如组织样本均为高脂样本或 部分为高脂样本，匀浆介质可统一用无水乙醇进行 匀浆提取。

④、细胞样本： 

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000 转/分， 离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用等渗缓冲 液（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液）清洗 1～2 次，同样 1000 转/分，离心 10 分钟，弃上清液， 留细胞沉淀； 

B、细胞破碎:加入 0.2～0.3mL 的匀浆介质（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水）进 行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率 300W，3～5 秒/次，间隔 30 秒,重复 3～5 次)或手动匀浆，制备好 的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推 荐 TritonX-100,1～2%,裂解 30～40 分钟)，裂解好的 液体不离心直接测定。

[注]：建议收集的细胞密度在 100 万个/mL 以上。破碎 好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。