Masson-三色染色液产品使用说明

Masson-三色染色液产品使用说明

产品名称：Masson-三色染色液

规格：7×50ml

储存条件：室温，避光

有效期：12个月

用途：经典胶原纤维染色,可区分胶原纤维和肌纤维。

产品简介：

结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维(collagen fiber)是分布最-广、含量最多的一种纤维。Masson 三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最-经典的一种方法，是胶原纤维染色权-威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维，该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，然而淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此 Masson 染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝)，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

Masson 三色染色的特点：①染色稳定；②分化时间短；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。

自备材料：

1、固定液：选用甲醛升-汞或甲醛盐溶液

2、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液

操作步骤(仅供参考)：

正式染色操作开始前请先做预实验。

1、切片常规脱蜡至水，用配制好的 Weigert 铁苏木素染色 5～10min。

2、用酸性乙醇分化液分化 2~10s，水洗。

3、用 Masson 蓝化液返蓝 30~60s，蒸馏水洗 1min。

4、丽春红品红染色液染色 5～10min，蒸馏水稍洗。

5、磷钼酸溶液洗 2～5min(不经水洗)。

6、直接入苯胺蓝染色液中染色 1～3min(不经水洗)。

7、用弱酸溶液冲洗切片，至无蓝色脱出(必要时，可镜下控制)。

8、95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水 3 次，每次 5～10s。

9、二甲苯或脱蜡透明液透明 3 次，每次 1～2min，中性树胶封固。

染色结果：

注意事项：

1、本染色液可以用滴染或浸染的方法染色，如片量较少建议用滴染法。

2、切片脱蜡应尽量干净，固定起着重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。

3、冰冻切片用乙-醚-乙醇混合固定液或甲醛型固定液固定 10s~3min，水洗即可染色。

4、取 A1、A2 等量混合即为 Weigert 铁苏木素染液，一般 24h 失去染色力。

5、 酸性乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。

6、该试剂用 Weigert 铁苏木素染液染核，也可用 Harris 苏木素染液染核，但染核后颜色不够鲜艳，本染色方法主要为了区分胶原纤维和肌纤维，两者鲜艳清晰即可，可不染核。

7、苏木素染核(蓝色)、丽春红酸性品红染肌纤维(红色)、苯胺蓝(蓝色)或固绿(绿色)染色胶原纤维，用固绿复染可实现三色染色，用苯胺蓝只有两种颜色。

8、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。

9、磷钼酸的作用是将被红染的胶原纤维分化至无色或淡红色，肌纤维、纤维素仍呈红色，另外对胶原纤维起媒染作用，使胶原纤维与大分子染料更容易的结合，分化时间根据染色深浅而定，一般 1～2min。

10、Masson 蓝化液亦可自行配制 Scott 促蓝液或 0.1～1%碳-酸锂水溶液予以替代。

11、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

12、本产品仅供科研实验用，不做其他用途。