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信帆生物:蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用

点击次数:1391     更新时间:2016-04-27

原 理 
蛋白质分子在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒,并可在电场内移动,其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的pH值,携带的静电荷不尽相同,致使它们在电场中的迁移率各异,从而达到分理的目的。
电泳原理示意图

在蛋白质组学中对电泳的分类

一维电泳(one dimensional gel electrophoresis, 1DE),现在普遍采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
二维电泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2DE),又称双向电泳

一维电泳
现在普遍采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),包括非变性电泳(native PAGE)和SDS-PAGE两种,前者主要是在分离蛋白复合物时经常用到。后者是在凝胶与缓冲系统中加入阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS),蛋白质分子被大量SDS阴离子包裹,消除了它们间原来携带的电荷差别,因而其迁移率仅反映蛋白质分子大小,故广泛用于蛋白质分子量的测定。
凝胶浓度和蛋白质分离范围

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