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甘油三酯(TG)含量测定试剂盒太好了!
产品内容:
规格:50 管/48 样
试剂内容:
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体×1 瓶,4℃避光保存。
试剂五:液体×1 瓶,4℃避光保存。
试剂六:液体×1 瓶,4℃避光保存。
标准品:液体×1 支,1mg/mL 标准甘油三酯溶液,4℃保存。
产品说明:
TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 测
定原理: 用异丙醇抽提取TG,KOH 皂化TG 后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,
在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在420 nm 有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG
含量成正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、双蒸水
操作步骤:
一、TG 的提取:
1、 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL
试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清待测。
2、 细胞、细菌:先收集400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL 试剂一,超声波破碎
1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g, 4℃离心10min,取上清待测。
3、 血清(浆)等液体样品:直接测定。
甘油三酯(TG)含量测定试剂盒太好了!
二、测定操作:
1. 分光光度计预热30min,调节波长到420 nm,蒸馏水调零。
2. 水浴锅预热到65℃。
空白管 标准管 测定管
双蒸水(μ l) 100
1mg/ml 标准液(μ l) 100
TG 待测液(μ l) 100
试剂一(μ l) 1250 1250 1250
试剂二(μ l) 250 250 250
加试剂一后充分混匀,再加试剂二,剧烈振荡30s,静置,待分层后取上层溶液0.15mL,置于
新的EP 管中。
3.甘油三酯含量测定:
空白管 标准管 测定管
上层溶液(μ l) 150 150 150
试剂三 (μ l) 500 500 500
试剂四(μ l) 150 150 150
充分混匀,65℃水浴3min
试剂五(μ l) 500 500 500
试剂六(μ l) 500 500 500
充分混匀,65℃水浴15min
取出EP 管,待冷却后,于420nm 处比色,记为A 空,A 标和A 测。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
3. zui低检出限为100μ mol/L。
注意事项:
1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2. 加试剂二后需剧烈震荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取。
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