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明胶酶谱分析试剂盒使用注意事项
信帆生物推出明胶酶谱分析试剂盒,检测基质金属蛋白酶MMP2,MMP9活性,操作方便简单,可以检测细胞样本,细胞培养上清样本,全血样本等,质量稳定!
操作注意事项:
1.制备聚丙烯酰胺时应注意排除气泡。
2.明胶酶谱的活性受钙离子,锌离子,和PH值等因素的影响,因此缓冲液配制应严格准确,尽量用超纯水,孵育温度也掌握好。
3.用大梳子
4.孵育液的PH在7.5-7.6,复性的TRITON时间长了会有絮状物,所以实验时尽量使用新鲜配置的。
5.孵育的37度不要在CO2培养箱中,因为会改变孵育液的PH值,在普通孵箱即可。
6.细胞样本用PBS 5倍体积震荡裂解,估算细胞的体积,然后加入5倍体积的PBS,涡旋振荡15-30s,而后静置或低速离心.或者手动震荡。
明胶酶谱分析试剂盒采用酶谱法(zymography)检测 MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一种广为使用的、基于SDS-PAGE 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达 1 nM,高于 ELISA 方法,而且可检测几百个样本。
明胶酶谱分析试剂盒使用注意事项