乙醇酸氧化酶（GO）提取液的实验方法及注意事项

   乙醇酸氧化酶(Glycolate oxidase，GO)是乙醇酸循环的一种酶，在乙醇酸代谢循环中乙醇酸通过乙醇酸氧化酶的作用而变成乙醛酸。光合作用与呼吸作用是植物代谢的两大核心内容，前者是物质合成与能量储存过程，属于同化作用，为包括人来在内的几乎所有生物的生存提供物质来源和能量来源；后者是物质分解与能量释放过程，属于异化作用，为生命提供能量。通过测定样品中乙醇酸氧化酶活性，了解植物的光合和呼吸代谢的基本方法。
   乙醇酸氧化酶(GO)提取液主要用于提取植物组织或果实中乙醇酸氧化酶。该试盒仅用于科研领域，不宜用于诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考)：

1、取新鲜植物叶片，清洗干净，吸水纸吸干，加入预冷的GO Lysis buffer，冰浴情况下充分匀浆或研磨，经纱布或滤纸过滤，将滤液置于离心管或试管。

2、离心，取上清液置于新的离心管或试管，调节pH 值,离心，取上清液。

3、不断混匀，离心，取上清液。

4、不断混匀，离心，弃上清液，留取沉淀即为乙醇酸氧化酶粗制品。

5、加入适量的GO悬浮液溶解沉淀，使其体积为开始提取液体积的1/10，即为乙醇酸氧化酶粗提液，保存待用。可考虑采用BCA蛋白定量法等检测乙醇酸氧化酶粗提液中蛋白质的浓度。
注意事项：

1、实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于-20~-80℃。

2、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应考虑酶标仪的大检测体

积。

3、所测样本的浓度过高，应用乙醇酸氧化酶(GO)提取液稀释样品后重新测定。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效

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