信帆生物销售黄嘌呤氧化酶，欢迎订购！

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测定意义：

XOD（EC 1.17.3.2）催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子，是活性氧主要来源之一；同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心，肺，肝脏等组织中，当肝功能受损时，XOD大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。

测定原理：

XOD催化黄嘌呤产生尿酸，尿酸在290nm下有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：100mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：30mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

1、细菌、细胞或组织样品的制备

收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

操作步骤：

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至2940nm，蒸馏水调零。

2、XOD检测工作液的配制：用时在每瓶试剂二中加入15mL试剂一，充分混匀，待用。

3、测定前将XOD检测工作液在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min以上。

4、在EP管中加入10μL样本和250μL工作液，立即混匀并计时，立即取200µL转移至微量石英比色皿或96孔板中，记录290nm下初始吸光值A1和1min后的吸光值A2。计算ΔA＝A2-A1。

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