ELISA实验中很常见的一些小问题，如何处理？

 ELISA实验中很常见的一些小问题，如何处理？

我们在做ELISA实验的时候，经常遇到一些小问题，比如样本如何处理，用什么软件处理ELISA的结果，信帆生物为您支招！

首先我们来了解一下ELISA样本处理的方法：

血清样本如何处理？

全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

血浆样本如何处理？

建议选择EDTA或者柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，于1000×g离心15分钟，仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

细胞上清液样本如何处理？
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（1000×g）。仔细收集上清

细胞裂解液样本如何处理？
    检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或者超声破碎，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右（5000×g）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织样本如何处理？
    用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。*后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测

接下来我们来看看检测数据用什么软件分析比较好呢？

ELISA标准曲线拟合可以应用Curve Expert软件进行数据分析。它使用非常方便，可以生成漂亮的曲线应用到论文之中。软件可以在下载中心进行下载。

 ELISA实验中很常见的一些小问题，如何处理？