人胱抑素C试剂盒正确操作！

人胱抑素C试剂盒正确操作！

产品名称：人胱抑素C试剂盒

规格：48T/96T

储存：2-8℃，避光保存

有效期：6个月

本产品仅供科研实验用，不做其它用途！

检测原理：试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先 包被人胱抑素C（Cys-C）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、 标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转 化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胱抑素C（Cys-C）呈正 相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品 浓度。

实验步骤（仅供参考）：

1． 使用前，将所有试剂充混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样的误差。

2． 根据待测样品数量加标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗T。盖膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。