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丙二醛含量的检测原理及使用!
丙二醛,是一种有机化合物,分子式为C3H4O2。
产品名称:丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量试剂盒(微量法)
检测意义:
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
检测原理:
MDA与硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在532nm有大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。
实验所需仪器设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;
实验步骤(仅供参考)
1、吸取0.3mL 试剂一于1.5mL离心管中,再加入0.1mL样本, 混匀。
2、100℃水浴中保温30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,常温,离心10min。
3、吸取200uL上清液于微量石英比色皿或96孔板中,测定532nm和600nm处的吸光度,记为A532和A600。
注意事项:
1.使用前注意试剂一是否*溶解,如未溶解,可以70℃加热,并振荡以促进溶解。
2.为了您的安全与健康,实验时请佩戴一次手套及防护服。
3.本产品仅供科研实验用,不做其它用途!