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植物组织蔗糖(sucrose)含量检测原理!

点击次数:2189     更新时间:2021-11-22

植物组织蔗糖(sucrose)含量检测原理!

蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。

测定原理:

酸性条件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100ml×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体5ml×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体 40ml×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体 10ml×1瓶,4℃保存;

试剂五:粉剂0.5g×1瓶,常温保存

蔗糖提取:

称取约0.1g样本,常温研碎,加入1mL提取液,适当研磨后快速转移到离心管中,置于80℃水浴锅中10min,振荡3~5次,冷却后,离心取上清,加入2mg试剂五,80℃脱色30min,再加入1mL提取液,离心后取上清液测定。

测定操作表(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):

试剂(μL

空白管

标准管

测定管

样本



100

试剂一


100


蒸馏水

100



试剂二

50

50

50

   混匀,100'C煮沸5min左右(盖紧,防止水分散失)

试剂三

700

700

700

试剂四

200

200

200

混匀,80℃水浴内反应10min左右,冷却后测定480nm处光吸收值,空白管、标准管和测定管分别记为A1A2A3

蔗糖含量计算:

1、按照蛋白质含量计算

蔗糖含量(mg/mg prot )=1mg/mL ×(A3A1)÷A2A1) ÷蛋白浓度mg/mL

2、按照样品质量计算

蔗糖含量(mg/g鲜重)=1mg/mL ×(A3A1)÷A2A1) ÷样品鲜重g/mL

 

本产品仅供科研实验用,不做其它用途!

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