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丙二醛(MDA)测试盒说明书

点击次数:2785     发布时间:2019/7/31
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丙二醛(MDA)测试盒说明书
本试剂盒是在国内外众多测试方法的基础上改进的一种微量、快速、简便、准确、对操作
人员健康无损害的测试方法。通过测试可反映出血清(浆)、乳汁等细胞外液、红细胞、白细
胞、培养细胞以及各种动植物的细胞水平及亚细胞水平的脂质过氧化物的量。
一、测定意义:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸
(polyunsaturated fatty acid,PUFA),引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。
如:醛基(丙二醛 MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂
质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式
或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形
成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自
由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸(PUFA)的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过
氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA 的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间
接地反映出细胞损伤的程度。
MDA 的测定常常与 SOD 的测定相互配合,SOD 活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的
能力,而 MDA 的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过 SOD 与 MDA 的结果
分析有助于医学、生物学、药理及工农业生物试剂的发展。
二、测试原理:
过氧化脂质降解产物中的丙二醛 (MDA)可与硫代酸 缩合,形成红色产物,
在 532nm 处有大吸收峰。因底物为硫代酸(Thibabituric Acid TBA)所以此法称 TBA
法。

) (TBA
三、 测试所需仪器设备:
可见光分光光度计,可调到 95℃左右的恒温水浴箱或沸水锅,离心机。
四、试剂盒组成与配制(100T/96 样):
试剂一:液体 20ml×1 瓶,室温保存。(天冷时会凝固,每次测试前适当水浴加温以加速溶解,
直至透明方可应用)。
试剂二:液体 12ml×1 瓶,用时每瓶加 340ml 双蒸水混匀,4℃冷藏(注意不要碰到皮肤上)。
试剂三:粉剂×1 支,用时将粉剂加入到 90℃~100℃的热双蒸水 60ml 中,(在溶解过程中可
适当加热),充分溶解后用双蒸水补足至 60ml 再加冰醋酸 60ml,混匀,配好的试剂
避光冷藏。(冰醋酸自备)
标准品:10nmol/ml 四乙氧基丙烷 5ml×1 瓶,4℃冷藏。
[注]:冰醋酸(分析纯,乙酸浓度≥99.5%);测试盒冷藏至少可保存一年。
五、试剂盒组成与配制(50T/48 样):
试剂一:液体 10ml×1 瓶,室温保存。(天冷时会凝固,每次测试前适当水浴加温以加速溶解,
直至透明方可应用)。
试剂二:液体 6ml×1 瓶,用时加 170ml 双蒸水混匀,4℃冷藏。(注意不要碰到皮肤上)。
试剂三:粉剂×1 支,用时将粉剂加入到 90℃~100℃的热双蒸水 30ml 中,(在溶解过程中可
适当加热),充分溶解后用双蒸水补足至 30ml 再加冰醋酸 30ml,混匀,配好的
试剂避光冷藏。(冰醋酸自备)
标准品:10nmol/ml 四乙氧基丙烷 5ml×1 瓶,4℃冷藏。

 
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