碘[125I]人促黄体生成 激素放射免疫分析药盒说明书 碘[125I]人促黄体生成激素放射免疫分析药盒说明书 【药品名称】 通用名：碘[125I]人促黄体生成激素放射免疫分析药盒 英文名：Iodine [125I] Human Luteiniziing Hormone Radioimmunoassay Kit 汉语拼音：Dian[125I] Rencuhuangtishengchengjisu Fangshemianyifenxi Yaohe
【成分】
规格 成分 | 100管 | 50管 | 制品 状态 | 1）LH标准品（S0-S6） | 7瓶(S0：5ml，其它各1ml) | 7瓶(S0：5ml，其它各1ml) | 液 体 | 2）125I-LH（红色） | 1瓶 | 1瓶 | 冻干品 | 3）兔抗-LH抗体（蓝色） | 1瓶 | 1瓶 | 冻干品 | 4）驴抗兔免疫分离剂 | 1瓶（50ml） | 1瓶（25ml） | 液 体 | 5）LH质控血清 | 2瓶（每瓶0.5ml） | 2瓶（每瓶0.5ml） | 液 体 |
【性状】液体组分(免疫分离剂除外)应澄清，无沉淀或絮状物；冻干组分应呈疏松状，复溶后应无沉淀或絮状物。 【放射性核素半衰期】本品所用核素为碘[125I]，其物理半衰期(T1/2)为60天。 【意义】 LH由垂体前叶嗜碱细胞分泌的一种糖蛋白激素，其蛋白部分由204个氨基酸构成α和β两个亚基，α亚基与FSH、TSH和HCG相同，只有β亚基具有特异的结构，两者通过非共价键连接，分子量约为30KD。LH和FSH都呈脉冲式分泌，故有较明显的日内和日间变异。女性月经中期的LH高峰促成排卵；男性LH主要刺激丸间质细胞分泌丸酮，又协同FSH促进精子成熟。LH的测定在预测排卵，诊断不孕症，研究和判断下丘脑-垂体-性腺轴功能及有关内分泌疾病的治疗监测等方面有重要意义。对作用于下丘脑-垂体-性腺轴的女性避孕药的药理研究也有很大价值。 本药盒采用放射免疫分析方法，测定人血清中的LH含量。 【测定原理】 应用竞争机制原理，标准或样品中的LH和加入的125I-LH共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125I-LH与抗体的结合量与标准或样品中LH的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分（B）与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，并计算相应结合率B/B0。用已知标准LH含量与对应结合率作图，即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中LH的含量。 【适用仪器】适用于各类γ-放射免疫分析仪。 【样本要求】 取静脉血分离血清，待测；如不当天测量，可将样品密封后，置于2~8℃或-20℃储存备测，2~8℃保存不应超过1周，-20℃保存不超过2个月。 【用法用量】 1 试剂配制、使用方法和保存 - LH标准品：液体，直接使用。浓度分别为0、5、10、25、50、100、200mIU/ml。2~8℃保存42天内稳定，未开封标准品2~8℃保存在标识的有效期内稳定。
- 125I-LH：冻干品，100管用10ml蒸馏水溶解，50管用5ml蒸馏水溶解，如一次加样超过100管，两瓶混合后使用。标记物放射性不大于111KBq(3μCi)。2~8℃保存标识的有效期内稳定。
- 兔抗-LH抗体：冻干品，用蒸馏水溶解，溶解方法见封底。同次实验抗体加样超过100管时，两瓶溶解后混合使用。抗体溶解后2~8℃保存可稳定42天，冻干品-20℃保存有效期内稳定。
- 驴抗兔免疫分离剂：液体，直接使用。加样前充分摇匀！2~8℃保存标识的有效期内稳定。开封后2~8℃保存45天内稳定。若加样超过100管，两瓶混合后摇匀。
- LH质控血清：使用方法，保存条件，有效期及附值，详见质控血清使用说明书。
2测定步骤 取圆底聚苯乙烯试管若干，用记号笔或特殊铅笔编号NSB、S0-S5和待测样品管等，然后用微量加样器按下表加样。加样前所有试剂（尤其分离剂！）包括待测样品要摇匀，并且平衡到室温。 操作程序表 单位：μl 管别 试剂 | 总T管 | NSB管 | S0~S6管 | 质控或待 测样品管 | LH标准品 | — | 300(S0) | 200 | — | 质控或待测样品 | — | — | — | 200 | 125I-LH | 100 | 100 | 100 | 100 | 兔抗-LH抗体 | — | — | 100 | 100 | 混匀，4℃放置过夜（16~24小时） | 驴抗兔免疫分离剂 | — | 500 | 500 | 500 | 充分摇匀后，室温放置15分钟，3500转/分钟离心15分钟，吸弃上清液，测各沉淀管的放射性计数(cpm)。 |
3数据处理 - 联机处理: 由电脑自动处理得出结果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，处理软件也不一样，用户一定要使用适合的处理软件进行数据处理。在此建议用户使用log-logit或四参数数据处理模式。
- 手工作图或计算器处理:
- 百分结合率计算：设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B，非特异管计数为NSB，则百分结合率计算公式为
B/ B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100% 3.2.2 logit计算：各标准点或样品管的logit值计算公式为 logit=ln[(B/ B0)/(1－B/ B0)] 3.2.3 手工作图：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标，对应的B/B0为纵坐标在log-logit坐标纸上画出标准曲线（理想化时是一条直线）。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意：如果使用普通坐标纸，查出的数值应取反对数才是zui后的浓度值。 3.2.4计算器处理：使用有线性拟合功能的计算器，可以比较方便地计算出样品浓度值，具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。 3.3 标准曲线举例（仅供参考，不得用于实际计算）。浓度单位mIU/ml 项目 | NSB | 0 | 5 | 10 | 25 | 50 | 100 | 200 | 百分结合率(%) | B/T | B/B0 | 2.2 | 40 | 85 | 76 | 59 | 34 | 26 | 11 | Log-logit数据处理模式主要曲线参数 | A=3.48 B=-2.34 R=-0.995 ED75=10.3 ED50＝30.0 ED25=87.7 |
【参考正常值】 正常人血清参考值： 男性：5~30 mIU/ml 女性：6~217 mIU/ml 滤泡期：2~30 mIU/ml 黄体期：0~20 mIU/ml 排卵高峰：40~200mIU/ml 由于地区及使用仪器不同，所测的正常值会存在一定的差异，所以本说明书提供的正常值仅作参考。各实验室能建立符合本实验室要求的正常值范围。 【产品性能指标】 - 标准范围：5~200mIU/ml
- 灵敏度：~1.0mIU/ml
- 精密度：批内变异系数（CV）<10%；批间变异系数（CV）<15%。
- 使用期限：见产品外包装。
【禁忌】本品仅供体外诊断用!
【注意事项】 - 收到药盒后，尽快存放在2~8℃。
- 使用前请详细阅读此说明书。
- 吸弃上清液时，注意不得损失沉淀物，否则将明显影响测定结果。
- 不同试剂盒或不同月份的同种药盒的组分不得混用。
- 药盒请在有效期内使用。
- 标本均应视为有潜在传染性，请按传染病实验室规程操作。
- 使用本药盒应注意放射防护，放射性废弃物须按放射防护条例规定处理。
- 使用本品的操作人员应经过专业技术培训。
【孕妇及哺乳期妇女用药】由于本品仅供体外诊断用，孕妇及哺乳期妇女不需接触本品，所以对其健康无损害。
【儿童用药】由于本品仅供体外诊断用，儿童不需接触本品，所以对其健康无损害。 【贮藏】2～8℃保存。 【有效期】1个月。 【执行标准】国家食品药品监督管理局《国家药品标准》，国家药典委员会 编 2005年5月，WS1-(R-58)-2004Z。 抗体溶解方法： 兔抗-LH抗体：用蒸馏水溶解， 100管产品每瓶抗体加 ml，50管产品抗体每瓶加 ml（如不填写，50管药盒用5ml溶解，100管药盒用10ml溶解，若为液体抗体请直接使用）。 【批准文号】国药准字S10950161 |
