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信帆生物科技有限公司代理销售“小鼠IgM类单克隆抗体纯化试剂盒",现货供应,欢迎。
IgM 类单克隆抗体纯化试剂盒使用说明书
立可纯C080202(50ML 纯化量)
试剂原理:
本试剂盒利用不同类别免疫球蛋白结构特性,通过大量实验分析验证而得到
的一个与传统纯化*不同的精细的具有高活性、高产率、快速以及良好重
复性的单克隆抗体的纯化方法,本试剂盒所用材料对人体没有损害,安全环
保。
试剂特点:
本试剂盒特点在于纯化操作的简单化、所得抗体的高活性和高纯
度。实验表明,本试剂盒可以得到95%左右纯度的抗体;并且由于配方考究,
抗体在纯化过程中几乎没有损伤,*保持应有的活性,实际应用*。
适用范围:
本试剂盒仅适用于小鼠IgM 类单克隆抗体腹水的纯化,不能用于其它
Ig 类或亚类单克隆抗体腹水的纯化实验,如需要可选择立可纯系列其它货号
的纯化试剂,它能为您带来满意结果。
试剂组成:
试剂名称数量试剂名称数量
纯化液A 65ml 30X 浓缩透析液150ml
纯化液B 50mL 透析袋1 根
纯化液C 30mL 说明书1 份
纯化液D 40mL 空白不干胶标签2 片
纯化步骤:
1、将单克隆抗体腹水从冰箱中取出,室温避光放置15 分钟,然
后用凉水边冲边摇匀快速解冻。
2、将化开的单克隆抗体腹水12000RPM 4-37℃离心10-20 分钟。
3、先吸弃zui上面浮沫和油脂,然后将上清转出到另一个干净容器或离心管;
按每1 毫升单克隆抗体腹水加入纯化液A 1.3 毫升,室温避光倒转20 分。
4、8000RPM 4-37℃离心10-20 分钟,沉淀用纯化液B 溶解到原单克隆抗体腹
水1/2 体积;再按每毫升加入纯化液C 1.2 毫升,室温避光倒转10 分钟。
5、8000RPM 4-37℃离心10-20 分钟,弃沉淀收集上清;每1.1 毫升上清液加
纯化液D 1.2 毫升,室温避光倒转20 分钟。
6、8000RPM 4-37℃离心10-20 分钟,收集沉淀用纯化液B 收集溶解沉淀到原
单克隆抗体腹水体积的1/2。
7、透析袋用PBST 浸泡3-5 分钟,然后用手揉捏数次,自来水冲净后接纯水冲
洗干净,将纯化好的抗体放入用透析夹或绳扎紧。
8、透析液用纯水稀释30 倍,将要透析的抗体袋子放入。抗体体积:透析液体
积=1:50,4℃搅拌透析每次1 小时,共3-4 次。
9、8000RPM 4-37℃离心10-20 分钟,收集上清测蛋白浓度并调控在5mg/ml
左右zui后加10/万NaN3 防腐并除菌过滤4℃备用。
注意事项:
1、溶血和腐败的腹水不得用于纯化(血性腹水离心后除去红细胞等可正常纯
化)。
2、离心温度不要超过37℃。
3、操作和量取试剂要细致。
4、不搅拌透析每次时间不得低于2 小时。
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