大鼠纤维连接蛋白（FN）elisa试剂盒实验原理

大鼠纤维连接蛋白(FN)elisa试剂盒基本信息简介

纤维粘连蛋白（fibronectin,FN)，又称纤粘蛋白，属非胶原糖蛋白的一种， 是一种冷不溶球蛋白,广泛存在于动物界， 包括海绵、海胆及哺乳动物类。在脊椎动物中, 纤粘连蛋白以可溶的形式存在于血浆和各种体液中，称为血浆纤维粘连蛋白；以不溶的纤维存在于细胞外基质、细胞之间及某些细胞表面, 称为细胞粘连蛋白。

FN是高相对分子质量的粘附性的糖蛋白， 含糖约5%。FN由两个亚基组成的二聚体，每个亚基的相对分子质量约250kDa, 各亚基在C末端形成两个二硫键交联。血浆FN是二聚体， 由两条相似的A链和B链组成, 整个分子成V形。细胞FN是多聚体，其不同来源的FN亚基结构相似, 但并不相同。不同的亚单位均为同一基因的表达产物， 只是转录后在RNA的剪接上有所不同,因而产生不同的mRNA。另外， 在翻译后的修饰上也有差异，FN的每个亚单位的蛋白组成若干个球形结构域, 各结构域之间由对胰蛋白酶敏感的肽链连接，因此可通过胰蛋白酶的水解作用分离这些结构域研究它们的功能。每个FN亚基上有与胶原、细胞表面受体、血纤蛋白和硫酸蛋白多糖高亲和结合的位点。

纤维连接蛋白（英文缩写FN）是1948年国外开始研究发现的一种高分子糖蛋白，具有多种生物学功能。FN广泛存在于动物组织和组织液中，是一种大分子糖蛋白，分子量约为450KD，具有多种生物活性。大量国内外的研究结果证明，FN分子在进化过程中保守性很强，各种动物体液中的FN具有非常相近的结构、性质和生物学功能，因而不同来源的FN可以相互替代使用。

我国对FN的应用研究起步较晚，国内纤维连接蛋白（FN）主要从国外进口，我国的郑州德福恩生物技术有限公司对纤维连接蛋白（FN）进行了多年研究，现已取得了纤维连接蛋白（FN）方面的多项国家发明。

大鼠纤维连接蛋白(FN)功能

作为生化试剂，为细胞培养及生物工程的工业化应用提供基础。FN的很多功能中，zui基本zui重要的一项是促进细胞的黏连生长，而细胞的黏连是机体结构得以维持、细胞生长完成的必要条件。因此，FN是细胞培养基的重要成分之一。郑州德福恩生物技术有限公司与中国医学科学院共同应用猪血浆FN研究结果表明：FN作为细胞培养的基质，可以使多种细胞的贴壁率达到90%以上（对照组为10%），细胞形态结构良好，细胞的代谢率增强，DNA、RNA及蛋白质合成速度提高约5倍，细胞的集落率升高几倍，原代培养的成活率明显提高，细胞生长时间缩短，这对建立人体疾病的体外模型是非常有益的。研究还证明，FN能提高细胞的融合率，缩短融合周期，可应用于许多科研中，如应用于细胞杂交瘤技术等。将FN涂到微球载体上作为细胞大量生物试剂的介质，可以节省空间，节省原材料，成为应用培养细胞技术来生物试剂新药品的基础物质。细胞培养技术是当今生物学研究中经常使用的方法之一，也是生物工程*的手段之一。FN产品的开发，将为细胞培养的广泛应用及生物工程的应用和发展起到积极的推动作用。FN作为生化试剂的使用量将与日俱增，市场潜力很大。FN生化试剂主要由美国Sigma公司生物试剂（人、牛、鼠血浆FN等），我国应用还主要依赖进口。所以，国内开发FN生化试剂是当务之急(郑州德福恩生物技术有限公司已开发出FN生化试剂，并已获得相关国家)。

大鼠纤维连接蛋白(FN)elisa试剂盒实验原理

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，zui后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。因此，ELISA检测是一项定位、定性和定量(敏感度可达每毫升ng~pg水平)的综合技术。常用的酶是辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AKP)。

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