人Ⅲ型胶原（PⅢP）elisa试剂盒是啥？

人Ⅲ型胶原(PⅢP)elisa试剂盒基本信息

Ⅲ型胶原蛋白，PⅢP，Ⅲ型前胶原经氨基端内切肽酶。

中文名     Ⅲ型胶原蛋白

正常值     0.6μg/ml        

简    称         PⅢP

作用酶     Ⅲ型前胶原经氨基端内切肽酶

1979年国外已建立测定血清PⅢP的放射免疫法(RIA)，并证实肝纤维化时血清PⅢP含量与肝炎症，坏死和肝纤维化有关，但以肝纤维化相关为主，因此血清PⅢP仍然是肝纤维化的重要标记物。PⅢP对于诊断儿童肝疾病没有意义，它随儿童年龄的增长有所升高。许多学者报道，血清PⅢP是反应成人肝纤维化活动的良好指标，可弥补肝活检不能动态观察等不足。肝硬化患者明显升高，但在肝硬化晚期，因Ⅲ型前胶原肽合成率降低，血清中PⅢP反而低于早期。PⅢP在区别慢性活动性肝炎与慢性迁延性肝炎有良好的帮助，慢性肝PⅢP水平明显升高，而在慢迁肝其含量与正常人无明显差别。

人Ⅲ型胶原(PⅢP)elisa试剂盒如何操作

    1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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