人饥饿素 ghrelin ELISA试剂盒的基本知识

点击次数：1003 更新时间：2017-10-11

人饥饿素 ghrelin ELISA试剂盒的基本知识

产品中文：	人饥饿素 (ghrelin) ELISA试剂盒
产品英文：	RAT IL-2 ELISA KIT
规格：	48T/96T
保质期：	6个月
保存条件：	2到8度

ELISA技术原理：以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来.

1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

2. 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

4. 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

5. 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

6. 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。

标本的保存：
人饥饿素 ghrelin ELISA试剂盒的基本知识

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入 10 ％（ v/v ）抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

一般说来，在 5 天内测定的标本可放置于 4℃，超过一周测定的需低温冻存。对收集后当天进行检测的标本，储存在 4 ℃ 备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时， -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部分标本也可加入适当防腐剂，激素类标本需添加抑肽酶。
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