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祝贺老师使用我司大鼠IL-1B ELISA试剂盒文章发表成功
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南华大学老师订购我司大鼠IL-1B,TNF-a试剂盒,文章发表成功,在此我们表示衷心的祝贺。南华大学也是我们的老客户,希望南华大学的老师和同学有更多的文章发表!
文章标题《BMSCs移植对缺血性脑卒中大鼠IL-1β、TNF-a表达的影响 》,文章用使用我司试剂盒如下:
祝贺南华大学老师用我司大鼠IL-1B试剂盒和TNF-a试剂盒发表文章成功
文章简介:目的 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem ceIIs,BMSCs)移植治疗大脑中动脉阻塞(Middle CerebralArtery Occlusion,MCAO)模型鼠后,在不同时间点采用western blot、 ELISA方法检测IL-1β、TNF-α的表达变化,分析BMSCs移植对缺血性脑卒中后炎性因子的影响,探讨BMSCs移植治疗缺血性脑卒中修复受损神经功能的可能抗炎机制。 方法 取幼年雄性SD大鼠骨髓腔细胞,通过全骨髓培养法和细胞贴壁培养法体外分离、培养、扩增得到BMSCs,传至第4代,免疫荧光法鉴定,诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞及神经干细胞并鉴定。取成年雄性SD大鼠,用Longa线栓法制造MCAO模型。
参考Bederson JB评分法测评大鼠神经功能缺损,筛选入组MCAO模型鼠;TTC染色法显示脑组织梗死范围,剔除TTC(-)或有出血的大鼠样本。 取造模成功的MCAO模型鼠*随机分为2组:A组/MCAO模型组(n=16),即建立MCAO模型后注射1ml生理盐水;B组/实验组(n=16),即建立MCAO模型后通过尾静脉注射法移植1ml2×l09/L BMSCs;A、B组各分为处理后1d、3d、7d、14d时间点亚组(n=4)。取正常大鼠设C组/空白组(n=4),不予任何干预。各亚组行心脏取血,ELISA方法检测大鼠血清IL-1β、TNF-α的表达变化;生理盐水灌注取脑,western blot方法检测大鼠脑组织IL-1β、TNF-α的表达变化。
结果 1.成功培养得到BMSCs。镜下细胞形态:原代BMSCs呈圆形或类圆形,贴壁数量少;经过纯化、扩增,贴壁细胞增多,呈长梭形,集落样生长,局部呈漩涡状;至P7代,细胞逐渐老化,以扁平细胞为主。细胞免疫荧光法鉴定:CD54(+)、CD34(-),符合BMSC免疫表型特点。BMSCs诱导为成骨细胞见细小颗粒于培养液;诱导为脂肪细胞见红色脂滴于胞浆;诱导为神经干细胞见棕色颗粒于胞浆。 2.大鼠神经功能评分:造模后1天实验组评分较模型组无明显差异(P0.05),3天、7天、14天实验组较模型组均有下降(P0.05),
差异有统计学意义。 3.大鼠血清IL-1β、TNF-α表达(单位:ng/L):1天、3天、7天、14天各亚组:IL-1β浓度为模型组27.0±0.35、29.2±0.60、25.2±0.65、22.8±0.66,实验组25.2±0.31、26.8±0.56、20.8±0.39、19.2±0.94,空白组10.9±0.54;TNF-α浓度为模型组231±1.46、225±4.98、216±4.16、198±4.61,实验组189±2.85、178±3.17、166±5.27、157±6.03,空白组146±6.86;模型组较空白组均明显增多(P0.05),实验组较模型组均减少(P0.05),但较空白组仍增多(P0.05)。
模型组及实验组与空白组比较:IL-1β表达1天增多,3天达高峰,7天下降,14天持续下降,但仍高于空白组(P0.05);TNF-α表达1天增多达高峰,3天下降,7天、14天缓慢下降,但仍高于空白组(P0.05),差异有统计学意义。 4.大鼠脑组织IL-1β、TNF-α表达(灰度值):1天、3天、7天、14天各亚组:IL-1β为模型组5502±108.9、6267±160.5、4425±158.1、3352±187.1,实验组4217±143.7、4706±111.8、3235±150.7、2307±120.7,空白组1874±70.7; TNF-α为模型组7801±148.9、6296±170.7、5399±240.9、3458±180.2;实验组6468±180.9、5789±119.7、4647±207.3、2828±152.6,空白组2215±159.5;模型组较空白组均增高(P0.05),实验组较模型组均降低(P0.05)较空白组增高(P0.05)。
模型组及实验组与空白组比较:IL-1β表达1天增高,3天达高峰,7天下降,14天持续下降但仍高于空白组(P0.05);TNF-α表达1天增高达高峰,3天下降,7天、14天缓慢下降,但仍高于空白组(P0.05),差异有统计学意义。
结论 1.缺血性脑卒中模型鼠中IL-1β、TNF-α表达增加,其神经损伤可能与炎症反应有关。 2.骨髓间充质干细胞移植可降低MCAO模型鼠IL-1β、TNF-α的表达,其修复神经功能的作用可能与BMSC下调炎性因子减轻炎症反应有关。
南华大学(University of South China),坐落于湖南省衡阳市,是由工业和信息化部、国家国防科技工业局、中国核工业集团公司、中国核工业建设集团公司与湖南省人民共建高校,涵盖哲学、经济学、法学、文学、艺术学、理学、工学、医学、管理学等9大学科门类,是省属重点综合性大学。学校是教育部批准的工程师、医生教育培养计划单位,是大学生创新创业训练基地、中国人民解fang军后备军官选拔培训基地,是全国毕业生就业典型经验高校。
学校始建于1958年,2000年原隶属国家核工业部的中南工学院、核工业第六研究所与原隶属湖南省的衡阳医学院合并组建成南华大学。2016年南华大学入选“中西部高校基础能力建设工程”第二期。2016年入选*批国家环境保护培训基地。
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