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催乳素(PRL)放免检测服务现货供应,PRL放免实验代测
催乳素是由垂体前叶分泌的蛋白激素,分子量为 2200dt。在雌激素、孕激素、皮质类固 醇作用的基础上,催乳素对泌乳的开始和维持起着重要作用,娠后血清催乳素逐渐增 加,至分娩前达到高峰,哺乳期进一步增加,催乳素的测定,对诊断垂体疾病,如垂体 瘤和泌乳综合症的诊断有重要价值,对月经异常和不孕症的诊断有重要意义。
本品采用了第二抗体+聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理:含催乳素(PRL)的样品 和 125I 标记的催乳素(PRL)与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及 PEG,使免疫复合物沉淀,离心,测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中催乳素 (PRL)的浓度。
本试剂盒标准品浓度采用 WHO 1st IRP75/504,与 WHO2nd IS83/562 的换算关系为: 1ng/ml(1st IRP)=21mIU/ml(2nd IS83/562)
2、 质控血清:两瓶,1.0 ml/瓶 浓度为: L:9.89±2.73 ng/ml H:50.08±10.07ng/ml
3、抗 PRL 抗体: 一瓶,绿色溶液,2~8℃冷存。
4、 125I-PRL: 一瓶,< 88.23 kBq/瓶,红色溶液,2~8℃冷存。
5、 分离剂:一瓶,蓝色溶液,充分摇匀后使用,2~8℃冷存。
[仪器] 1、 γ-计数器 2、低温离心机
操作方法 I
1、 将实验所需试剂及样本放置室温,平衡至少 30 分钟以上才可进行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复;
3、 取每个浓度的标准品、质控血清和样本 100µl 加入相应编号的试管中;
4、 每管均各加入 200µl 标记物工作液;
5、 每管均各加入 200µl 抗体工作液,充分混匀;
6、 37℃温育 180 分钟;
7、 每管均各加入 500µl 分离剂后,充分混匀;
8、 室温放置 5~10 分钟后,离心 3500 转/分,20 分钟后,吸去或倾倒掉上清液;
9、用 γ-计数器测定各管计数CPM. 检测时间: 1 分钟
10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。
[实验过程中应注意] 1、 γ-计数器本底计数应≤100CPM/分,效率应≥75%;
2、 加入放射性标记物时,应做好防护、小心谨慎,以避免造成放射性污染;
3、 如果某一个样本的测定值高于高浓度的标准品浓度,用零标准品以 1:2 或 1: 4 的比例稀释样本后重新测试,测试结果乘以相应的稀释倍数。
[质量控制] 每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制,以确保每次实验测定结果 的可靠性。
1、 质控血清的平均值应在允许范围内;
2、 曲线方程应采用佳拟合方式;
3、 重复样本的测定结果相差在 15%以内。 如不能同时满足以上条件,则此次试验结果无效,全部试验需重新进行。
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