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引物合成文献上线啦

点击次数:393     更新时间:2023-06-29

祝贺三峡大学第一临床医学院订购我司试剂发表文章成功


文章标题:《Rho激酶抑制剂Y-27632对肝癌HepG2细胞株增殖的影响及机制探讨》


关键词:

肝癌HepG2细胞;化疗敏感性;顺铂;Rho激酶;Y-27632;


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引物合成是一种化学合成,一般都采用β--乙腈亚磷酰胺化学合成引物,合成时从3’→5’方向进行,通常3’端的第一个碱基结合在CPG (Controlled Pore Glass,CPG)上。

§脱保护:脱掉附加在CPG单体上的第一个碱基5’-OH基团上的保护基 (DMTr),准备附加下一个新的碱基。

§活化:活化新的碱基单体 (Phosphoramidite),准备与第一个碱基进行反应。

§偶联:第二个碱基与第一个碱基发生偶联反应。

§封闭:将没有反应的第一个碱基的5’-OH加帽封死 (Capping),使其不再进一步参与反应。

§氧化:将核苷亚磷酸酯氧化成更稳定的核苷磷酸酯(即将三价磷氧化成五价磷)。

重复进行一至五的步骤,直至合成完所需的引物 DNA序列。合成结束后,将引物分子从CPG上切下,再进行进一步的纯化。

纯化 | 量体裁衣做选择

DSL(脱盐)纯化,PAGE纯化,HPLC纯化是目前常会用到的几种纯化方式。建议您根据自己合成引物的长度和后续实验的需要做出合适的选择。

 

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