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如何才能做出高品质免疫组化图片
免疫组化:根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗(如链霉亲和素等)结合,后通过光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而进行对抗原进行定位。
免疫组化(IHC)实验代测
结果展示:
1.预实验结果 确认抗体稀释倍数和样本情况
2.正式结果图片:提供染好的片子,结果以扫片形式提供,老师可查看任意视野,倍数也可任意调节。
3.实验结果分析(片子分析需另外收费,可选做)
实验要求:
客户需自备一抗,本公司可代为购买一抗。
客户需提供详细的样品资料(如组织来源等),以便于实验的顺利进行。
技术部将在收到标本后15-20个工作日之内将作好的片子交于客户。
送样运输要求:
注意事项:
1)石蜡切片制片,组织取样后应立即放入固定液中,避免冻存;
2)冰冻切片制片应取用新鲜组织,以免抗原丢失;
我们承诺免免疫组化相关技术人员操作规范,并设立完备的阴性对照,为您提供高质量的免疫组化检测结果。
免疫组化:服务内容和流程:
1.组织标本固定好后,我们开始组织脱水、石蜡包埋、石蜡切片;
2.常规染色(HE染色)或特殊病理染色(masson、PAS染色等);
3.免疫组化检测;
4.图片拍照、图片分析、数据统计。且拍片位置准确、效果好,免去您自己花大量时间坐在显微镜前拍片的烦恼。
免疫组化实验服务:
您需提供:固定好的样本、石蜡块均可,一抗;
我们提供:免疫组化实验报告、免疫组化结果图片、实验结果的分析和统计(阳性率分析);
实验周期:2周。
一抗的选点和技巧
(1)单克隆和多克隆抗体的选择。单克隆和多克隆抗体的内在特征决定了它们用于IHC/ICC时的优势和限制。单克隆抗体由单个B细胞克隆产生,代表了同质群体,能够高亲和力高特异性地与单个表位结合。这在检测蛋白家族的某个成员时特别有用,因为蛋白家族有着高比例的氨基酸同源性。
抗体结合往往依赖于目标蛋白维持其天然的构想状态。与其他蛋白的相互作用、翻译后修饰、温度、pH、固定和盐浓度都会影响抗体接近目的表位。多克隆抗体是异质的,可识别多个表位,因此它们较少受到蛋白构象变化的影响。
一般而言,多克隆抗体在一定pH和盐浓度范围内也比单克隆抗体更为稳定。基于这些原因,多克隆抗体更常用于IHC/ICC实验。
(2)应用范围的选择。有的一抗只能用于Western Blotting,或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等;甚至表明石蜡切片或冰冻切片。
(3)种属反应性的选择。这一点很重要,表明这种抗体可能存在种属差异,且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。
(4)种属来源,一般兔来源的多是多克隆;而小鼠来源的多是单克隆,但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。
(5)生产厂家的选择。
尊敬的客户:
本公司有放射免疫技术服务、蛋白质组学服务、免疫组化、PCR技术服务、生物信息学数据分析等,如果您想了解免疫组化的更多内容或者其他服务信息,您可以本公司的服务热线了解更多产品的详细信息,至善至美的服务是我们永无止境的追求,欢迎新老客户放心选购自己心仪产品,我们将竭诚为您服务!