Mg 2+ -EGTA-ATP 酶测试盒，准确称取鱼肉样本，自然解冻，剪碎。称取碎肉 1g，加入 15mL 预冷的生理盐水作为匀浆介质进行匀浆，然后用 9500rpm 冷冻离心 30min，取上清液，加入 3 倍预冷的双蒸水，摇匀，再次用 9500rpm 冷冻离心30min，弃上清液，留沉淀。

Mg 2+ -EGTA-ATP 酶测试盒

（货号：A070-7 测鱼肉样本）

二、测定原理：

肌动球蛋白及肌动蛋白的ATPase很容易受到Ca 2+、Mg 2+、

EGTA、对氯汞基苯（PCMB）、离子强度及 pH 值的影响。因

此，选择严格的条件来测定 ATPase 活性，可以反映出蛋白质

特定的性质。组成鱼类肌肉蛋白质的肌动球蛋白和肌动蛋白

在切断 ATP 末端的磷酸基后生成 ADP 和无机磷酸。利用这一

点，将生成的无机磷酸比色定量后可以表示 ATPase 活性。

三、样本的前处理：

鱼肉肌原纤维蛋白的提取:准确称取鱼肉样本，自然解冻，

剪碎。称取碎肉 1g，加入 15mL 预冷的生理盐水作为匀浆介

质进行匀浆，然后用 9500rpm 冷冻离心 30min，取上清液，

加入 3 倍预冷的双蒸水，摇匀，再次用 9500rpm 冷冻离心

30min，弃上清液，留沉淀。用预冷的生理盐水溶解，用力摇

匀，最后用 9500rpm 冷冻离心 20min，取上清液，即为肌原

纤维蛋白液。

四、规范操作步骤：

1、酶促反应：

六、测定意义：

ATP 酶 活 性 可 以 分 为 Ca 2+ -ATPase 活 性 、

Mg 2+ -ATPase 活 性 、 Ca 2+ -Mg 2+ -ATPase 活 性 和

Mg 2+ -EGTA-ATPase 活性。Ca 2+ -ATPase 活性是评价肌球

蛋白完整性的良好指标，Mg 2+ -ATPaSe 活性是在有内源

性 Ca 2+情况下评价肌动球蛋白复合体的完整性的指标，

Ca 2+ -Mg 2+ -ATPaSe 活性是在无内源性 Ca 2+情况下评价肌

动球蛋白复合体的完整性的指标，而Mg 2+ -EGTA-ATPase

活性则表明了原肌球蛋白-肌钙蛋白复合体的完整性。因

此肌原纤维蛋白的 ATPase 活性常常作为评价肌动球蛋

白完整性的指标，用于评价鱼肉或鱼糜蛋白的变性程度。

Mg 2+ -EGTA-ATP 酶测试盒