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淀-粉酶(AMS)(检测服务)
服务介绍:
淀-粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)其检测原理是血清或血浆等样品中α-淀-粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等,碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝色复合物,其蓝色深浅与未经酶促反应的空白比较,可计算出淀-粉酶的活力单位,通过分光光度计检测660nm处吸光度,可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀-粉酶活性。
背景介绍:
淀-粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称,通常通过淀-粉酶催化水解织物上的淀粉浆料,由于淀-粉酶的高效性及专一性,酶退浆的退浆率高,退浆快,污染少,产品比酸法、碱法更柔软,且不损伤纤维。淀-粉酶的种类很多,根据织物不同,设备组合不同,工艺流程也不同,所用的退浆方法有浸渍法、堆置法、卷染法、连续洗等,由于淀-粉酶退浆机械作用小,水的用量少,可以在低温条件下达到退浆效果,具有鲜明的环保特色。
淀-粉酶的分类:
1、α-淀-粉酶(EC 3.2.1.1):广泛分布于动物(如唾液、胰脏等)、植物(如麦芽、山萮菜)及微生物中。该酶以Ca2+为必需因子,无差别地随机切断糖链内部的α-1,4-链,主要产生葡萄糖、麦芽三糖及麦芽糖。
2、β-淀-粉酶(EC 3.2.1.2):主要见于高等植物中(如大麦、小麦、甘薯、大豆等),也有报告在细菌、牛乳、霉菌中存在。该酶从非还原性末端逐次以麦芽糖为单位切断α-1,4-葡聚糖链,主要产生麦芽糖和少量的葡萄糖。
3、γ-淀-粉酶:是外切酶,从淀粉分子非还原端依次切割α(1→4)链糖苷键和α(1→6)链糖苷键,逐个切下葡萄糖残基。
应用领域:
1、工业领域:淀-粉酶在食品加工、酿造、纺织等领域发挥重要作用,如用于棉织物的退浆和蚕丝的脱胶。
2、医学领域:淀-粉酶作为诊断工具,主要用于急性胰腺炎的鉴别诊断。血清淀粉酶活性的升高意味着胰腺可能受损,可能需要治疗。
操作步骤(仅供参考):
1、 准备样品:
①细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-20℃冻存,用于AMS的检测。
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水5~10倍稀释后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常用生理盐水10~20倍稀释后直接用于测定,-20℃冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了样品但不加底物的对照。
③高活性样品:如果样品中含有较高活性的AMS,可使用生理盐水或PBS等进行稀释。
④样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度(mg/ml),以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的AMS含量。
2、 AMS加样:按照下表设置空白管、测定管,溶液应按照顺序依次加入
加入物(ml) | 测定管 | 空白管 |
AMS Assay Buffer | 0.5 | 0.5 |
37℃孵育5min。 | ||
待测样品 | 0.1 | — |
混匀,置于37℃水浴,准确孵育7.5min。 | ||
KI工作液 | 0.5 | 0.5 |
蒸馏水 | 3.0 | 3.1 |
3、 AMS测定:轻轻混匀,蒸馏水调零,分光光度计(比色杯光径1cm)测定660nm处吸光度(记为A测定和A空白)。
实验结果:
全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。
送样须知:
1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务,提前一天联系
2.外地客户可邮寄样本,样本运输应符合一般的生物学要求,密封加冰袋或者干冰运输
3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性,请务必提前告知
4.测试结束提供实验报告后,样本可以保留1个月,若需保留样本或者回收样本请提前告知。
备注:本公司对客户的项目的专有技术和资料(包括实验方案,测试结果,样本等)负有保密的责任。
仅供科研实验用,不做其他用途!
淀-粉酶(AMS)(检测服务)