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豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒

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上海信帆生物供应豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒,提供技术指导和售后服务。本公司销售的试剂盒均采用进口材料生物试剂,具有操作简单,灵敏度高等特点,咨询

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豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒
本试剂盒含量是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系
问题1:如果我们代测的样本是组织样本,请问应该选用什么来组织匀浆,浓度是多少?
答:一般我们试剂盒的组织匀浆,都是按照10%进行匀浆,即1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液可以选取生理盐水,也可以选取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol.
问题2:请问试剂盒在zui后计算的时候,用一般试剂盒测要测组织蛋白浓度,zui后计算出来的,我们的试剂盒是不是也需要这样操作?具体怎么计算?
答:对于组织样本来讲,我们建议做蛋白定量.然后把测得的结果比上蛋白定量的结果,zui终得到每g蛋白中含有指标的量,这样更为准确!如果不做蛋白定量的话,就是得到每g组织中含有量!
问题3:请问我订购了你们的试剂盒,但是样本是分批次收集的,我可以分批次实验吗。
答:可以的,我们的试剂盒横条是可拆卸的,试剂盒使用之后放到2-8度冰箱保存,下次可以继续使用,但是建议是拆封之后一个月内用完。
问题4:请问各种标本的处理方式,你可以发给我一下吗?
答:当然可以。标本要求如下:
在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参? 照此实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
问题5:麻烦把试剂盒的具体操作步骤发给我一下,谢谢!
答:好的,详细的操作步骤如下:
1. 加样:标准品设定5个浓度点10个孔,每个浓度设定平行孔,加入50微升不同浓度的标准品,空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔,在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
6. 温育:操作同3。
7. 洗涤:操作同5。
8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒
问题6:试剂盒操作过程中有什么注意事项吗?
答:有的,具体的注意事项如下:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
11. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
问题7:请问操作完之后,应该怎么计算呢?
答:你好,操作完成之后,详细的计算方式是:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
问题8:请问你们试剂盒的性能如何?
答:试剂盒性能的性能我们是通过几个数值反应的:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批间应分别小于9%和11%
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒
上海信帆生物公司主要代理产品:
ELISA试剂盒:进口ELISA试剂盒,国产ELISA试剂盒,人elisa试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒等。
培养基:微生物培养基,显色培养基,BD培养基,gibco培养基等。
血清:胎牛血清,人血清,动物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原装血清 。
生物试剂:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等进口试剂。
标准品对照品:进口对照品,进口对照药材,进口标准品.
抗体:一抗,二抗,流式抗体等。
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实验室代测服务:放免代测,WB实验,免疫组化代测,荧光定量PCR代测,病理细胞染色代测,生化实验代测等。
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