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PCR实验代测服务

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PCR实验代测服务,基线(baseline)通常是3-15个循环的荧光信号,同一次反应中针对不同的基因需单独设置基线

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PCR实验代测服务


Real-time qPCR常见参数

基线(baseline)通常是3-15个循环的荧光信号

同一次反应中针对不同的基因需单独设置基线

阈值(threshold)

自动设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍

手动设置:置于指数扩增期,刚好可以清楚地看到荧光信号明显增强

同一次反应中针对不同的基因可单独设置阈值,但对于同一个基因扩增一定要用同一个阈值。

Ct值:与起始浓度的对数成线性关系。

分析定量时候一般取Ct:15-35。太大或者太小都会导致定量的不准确。

Rn(Normalized reporter)是荧光报告基团的荧光发射强度与参比染料的荧光发射强度的比值。

△Rn:△Rn是Rn扣除基线后得到的标准化结果(△Rn=Rn-基线)。


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