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己糖激酶(HK)实验代测

  • 型   号:(HK)
  • 价   格:25

己糖激酶(hexokinase,HK)是一种转移酶,专一性不强,受葡萄糖-6-磷酸和ADP的抑制,Km(米氏常数)小、亲和性强,可以针对多种六碳糖进行作用。
己糖激酶(HK)实验代测

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己糖激酶(HK)实验代测

己糖激酶(hexokinase,HK)是一种转移酶,专一性不强,受葡萄糖-6-磷酸和ADP的抑制,Km(米氏常数)小、亲和性强,可以针对多种六碳糖进行作用。
测定原理:应用6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PD)的偶联反应,在提供足量的底物条件下生成NADPH,在340nm波长处,通过测定吸光度的增加值来反应HK的活性。 
已糖激酶广泛存在于以糖为能源的细胞,但在酵母、肝脏、肌肉、脑等最多。该酶可被结晶化。动物的已糖激酶是作为同工酶而存在的。已糖激励机制酶遗传性缺乏是导致非球形细胞溶血性贫血的原因之一。建立红细胞HK的测定方法对研究不明原因的溶血极为重要。
应用6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PD)的偶联反应,在提供足量的底物条件下,在340nm波长处,通过测定吸光度的增加值来反映HK的活性。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约1小时,可测50例左右样本。
2、取样量微:本法取样量仅为50l。
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.2%。
5、回收试验: X =103%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织    、红细胞(有单独试剂盒)以及各种水产等,效果均佳。
所需仪器及自备试剂:
1、紫外分光光度计(比色测定波长为340nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱(温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按说明书操作将配好的混合液37℃水浴10分钟后加R5和样本50l
2、340nm波长,0.5cm光径,测得OD值为A1
3、20分钟340nm波长,0.5cm光径,测得OD值为A2

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