胃蛋白酶实验代测

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胃蛋白酶实验代测

测定原理： 
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物与福林试剂反应后显蓝色；一定范围内，其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。 
胃蛋白酶（英文名称：Pepsin）是一种消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主细胞（gastric chief cell）所分泌，功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。主细胞分泌的是胃蛋白酶原，胃蛋白酶原经胃酸或者胃蛋白酶刺激后形成胃蛋白酶，胃蛋白酶不是由细胞直接生成的。
胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌，在PH 1.5-5.0条件下，被活化成胃蛋白酶，将蛋白质分解为胨，一部分被分解为酷氨酸、苯丙酸等氨基酸。胃液胃蛋白酶测定可用于鉴别神经性低酸症和胃性低酸症，当胃酸过少或缺乏时，前者胃蛋白酶的含量有时正常而后者盐酸与胃蛋白酶同时缺乏。一般认为胃性低酸症是由于胃粘膜的重症器质性变化所致，研究具有重要的参考意义。胃癌、性胃炎、慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二脂肠炎、恶性贫血以及功能减退等胃蛋白酶的分泌常减少。一般胃酸基础分泌高的，如十二脂肠溃疡等，胃蛋白酶活性增高。
胃蛋白酶可水解蛋白产生含酚的氨基酸，而酚试剂可被含酚的氨基酸还原成蓝色物质，通过比色可测定胃蛋白酶活力。
产品优点如下：
1、稳定性好：试剂盒2～8℃存放1个月有效。
2、再现性好：变异系数CV=1.7%。
3、回收试验： X =104%。
4、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
5、测试范围：可测动物胃液、组织等。
所需仪器及自备试剂：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为660nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
胃液: 先做预试，再根据活力大小进行取样操作
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程：
1、按步骤加入样本和R1、R2, 37℃准确水浴10分钟
2、测定管加入R1, 37℃水浴10分钟，3500转/分离心10分钟
3、取上清加R3、R4,37℃水浴20分钟
4、660nm波长，1cm光径，比色

胃蛋白酶实验代测