羧酸酯酶（CarE）实验代测

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羧酸酯酶（CarE）实验代测

测定原理：羧酸酯酶能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，固蓝显色，在450nm检测光吸收速率来监测萘酯，生成速率，从而计算CarE活性。
羧酸酯酶是一种多聚蛋白，主要催化酯、硫酸酯和酰胺的水解。
carboxylesterase
羧酸酯酶主要位于肝、其他组织及细胞胞液、线粒体和内质网。
测定意义：哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷可结合并且抑制CarE活性。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配置：试剂一:液体×1瓶,4℃保存
                                试剂一:液体×1瓶,4℃保存
测定步骤：1、分光光度计预热30min,调节波长到450 nm,蒸馏水调零。
                    2、试剂二置于37℃水浴中预热30 min。
                    3、空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入5μL蒸馏水和1000μL试剂二,迅速混匀,于450nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A1,第190s吸光值记为                   A2。△A空白管=A2-A1
                  4、测定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入5μL上清液和1000μL试剂二,迅速混匀,于450nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A3,第190s吸光值记为A4。△A测定管=A4-A3
注意：空白管只需测定一次。

羧酸酯酶（CarE）实验代测