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高脂样本总胆固醇(TC)酶法测定试剂盒
操作步骤;
一. 组织细胞裂解:
裂解前,组织或细胞用PBS洗涤2次去除残存血液或培养基血清,以免影响胆固醇测定。
1)培养细胞裂解:
消化、离心收集细胞或直接在培养皿内裂解。通常6孔板单孔约2x106个细胞,75cm2瓶约1x107细胞。按比例每1x106个细胞加0.1ml裂解液,震荡混匀,静置10分钟。
2) 动物组织裂解:
切记要预先将新鲜组织剪切称重后再进行保存。组织冻存后再进行解冻、剪切、称重可能会产生严重的测量误差。离心管精确称重,加入组织块后再称重,二者相减(即减量称重法)计算组织重量(约100mg)。强烈建议按比例每1mg组织加10µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。(注意;裂解液用量在1ml或更多可保证有效的裂解与脂质提取)。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织。(不超声方法,因其不能*和均匀破碎。应根据预实验调整初始的组织细胞加入量),而后静置10分钟。
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