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组织细胞谷胱甘肽还原酶检测试剂盒

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组织细胞谷胱甘肽还原酶检测试剂盒是一种灵敏简单的利用比色法检测谷胱甘肽还原酶(GR)活性的试剂盒。谷胱甘肽包括还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)。GSH 是细胞中巯基的主要来源,对于维护蛋白巯基适当的氧化还原状态有重要作用。GR广泛分布在各种组织细胞和体液中,可以还原GSSG生成GSH,维持细胞内或体液中充足的GSH。

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组织细胞谷胱甘肽还原酶检测试剂盒

GR可以将GSSG还原为GSH,GSH可以和DTNB反应生成黄色的TNB和GSSG。在GSSG和DTNB相对过量的条件下,利用该反应可以通过测定生成TNB的吸光度(A412nm)定量检测GR活性。本试剂盒以GSH以TNB标准品和反应时间定量GR酶活性。检测线性范围为4.7-150mU/ml,灵敏度≤4.7mU/ml。

适用范围:本试剂盒能够检测培养细胞、实体动物组织等多种其它生物样本中的GR活性。

 

利用TNB标准品的量为横坐标,吸光度值为纵坐标制作标准曲线,并获得横纵坐标之间的函数关系式,然后利用该标准曲线和各样品的吸光度值计算样品中一定时间段(注:计算酶活性的时间段采用5-15分钟时间段,这样可以避免样品本身的颜色及样品中较高浓度GSH和NADPH对反应的干扰)内产生的TNB量,从而换算为谷胱甘肽还原酶活力(注意精确计时)。对于细胞和组织样品,可以根据样品中蛋白浓度测定,计算每毫克蛋白中谷胱甘肽还原酶活力。由于有多个时间点的测定,可以选择时间线性良好的时间段计算谷胱甘肽还原酶活力。

谷胱甘肽还原酶定义:在25℃,PH 7.6条件下,每分钟还原1.0μmol GSSG为GSH的谷胱甘肽还原酶为1 U,1 U=1000 mU。

      计算公式:酶活力(mU)=TNB生成量(nmol)/2/反应时间(min)。

 

组织细胞谷胱甘肽还原酶检测试剂盒

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