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铁离子比色法检测试剂盒 生化试剂

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产品名称:铁离子比色法检测试剂盒
产品货号:XFP10451
产品规格:100T
储存条件:4℃保存
本产品仅供科研实验用,不做其它用途!

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所有产品仅供科研使用,不能用于食用和医疗等

产品名称:铁离子比色法检测试剂盒

产品货号:XFP10451

产品规格:100T

储存条件:4℃保存

细胞铁离子检测试剂盒可用于培养细胞中铁离子定量检测。本试剂盒采用亚铁嗪比色法可以定量细胞铁离子,线性范围5~300uM。产品包括标准品和空白对照,本试剂盒可进行100个样品的检测。铁是人体必需的元素之一,对人体的新陈代谢和身体健康具有重要作用,血液中铁的含量不足,就会造成缺铁性贫血。铁存在于人体所有的细胞内,各组织、器官包括各内分泌腺都含有铁。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰富。成人体内含铁3~5克,大部分都以蛋白质复合物形式存在,极少部分以离子的形态存在。

检测原理:


铁与蛋白结合成复合物,在酸性介质中铁从复合物中解离出来,再被还原剂还原成二价铁, 并与亚铁嗪生成紫红色化合物,在 540-580nm 处可比色测定。

产品组成:


 A. 细胞裂解液: 20 ml

B. 缓冲液: 5ml

C. 检测剂: 3ml

D. 标准品: 1ml

E. 稀释用液: 20ml 


实验步骤:

1.  样品准备(以24孔板为例):

将含铁元素DMEM培养过的细胞用冷的PBS 2ml洗两遍,将PBS吸弃(若不马上检测可将其冻存于-20℃)。200ul/孔裂解液裂解细胞,置于摇床裂解2h。

2. 标准品的稀释:用试剂盒提供的稀释用液将3mM 的标准品母液稀释为:300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀释并设置0浓度对照反应管。

3.  将缓冲液与4.5%高锰-酸钾溶液按1:1混匀,称为混液A。 注意:用户自备4.5%高锰-酸钾溶液 5ml。

4.  参考下表使用1.5ml离心管,设置空白对照管、标准品管和样品管。如果样品中的铁元素含量过高,用裂解液适当稀释后再进行测定。

                           空白对照         稀释后的标准品   裂解的样品

稀释用液                        100μl               - 

混液A                         100μl             100μl                        100μl

样品                                   -                         -                        100μl

标准品工作液                   -                     100μl                            -

 

5.  混匀,60℃ 孵育1h。

6.  冷却至室温,将管盖与管壁上的液滴离心入管底。

7.  加入30ul 铁离子检测剂,混匀,室温孵育,30min。

8. 取200ul 于96孔板,在550nm测定吸光度。如果不能测定550nm,也可以在540nm~580nm范围内检测。

9.  绘制标准曲线并计算铁离子浓度。



 本产品仅供科研实验用,不做其它用途!

铁离子比色法检测试剂盒

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