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WB实验代测 检测服务
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WB实验代测服务项目:WB检测/抗体费用样本运输要求:1、组织新鲜标本,100mg以上(绿豆大小);2、细胞数106离心收集沉淀,绿豆大小。3、全程干冰运输。信帆生物提供各类实验代测服务,更多服务项目欢迎致电咨询,我们将竭诚为您服务!
WB实验代测
免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。
Western blotting服务实验流程
u 细胞及组织蛋白质抽提;
u 蛋白质定量;
u 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE);
u 蛋白质转膜;
u 膜的封闭;
u 一抗、二抗孵育;
u 结果检测:化学发光法检测,X 胶片曝光显影;
u 数据分析;
代测说明:
1、有趋势,不需做预实验。
2、没有趋势,要求做预实验。
3、WB检测里包含了蛋白提取。
4、实验结束,返还胶图。
5、一个指标只能跑一张膜
WB实验代测的优势:
1、western免疫印迹是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
2、与southern或northern杂交方法类似,但western免疫印迹采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针"是抗体,“显色"用标记的二抗。
3、经过page分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
4、以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。