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GST-琼脂糖凝胶FF

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GST-琼脂糖凝胶FF
英文名称:GST- Berpharose FF
货号:B2821
规格:1ml
本产品仅供科研实验用,不做其它用途!

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发邮件给我们:2409400669@qq.com

GST-琼脂糖凝胶FF


英文名称:GST- Berpharose FF


货号:B2821


规格:1ml


1.产品介绍


GST-琼脂糖凝胶FF是一种将谷胱-甘肽键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极-好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有载量高、非特异性吸附少、流速快等特点,主要用于谷胱-甘肽转移酶标记蛋白(GST融合蛋白)、谷胱-甘肽转移酶和谷胱-甘肽依赖蛋白的分离纯化。


2.规格


1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、20ml、100ml、500ml 使用方法:


①推荐缓冲液:


平衡缓冲液:10 mM PBS(140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.3)。


洗脱缓冲液:50 mM Tris-HCl, 10 mM还原型谷胱-甘肽(GSH), pH 8.0


②平衡


用平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱,观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数不变。


③上样


切换转换阀进行上样,上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可进行线性实验找到上样量。样品的预处理:置换缓冲液,澄清过滤(0.45μm、0.22μm)等。


④冲洗


用2~3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱,观察检测器的变化,直到电导率、pH等参数不变。此时未交换的组分将被清洗出去。


⑤洗脱


一般推荐用10 mM还原型谷胱-甘肽溶液(可含缓冲成分)进行洗脱。


⑥再生


用蒸馏水按操作流速冲洗3~5个柱体积,接着用平衡液洗到平衡3~5个柱体积。再生时若有失活的蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗(CIP)法除去。


⑦在位清洗(CIP)


去除沉淀和变性蛋白:用2个柱体积的6 M盐酸胍清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5个柱体积。去除强疏水蛋白:用3~4个柱体积的70%乙醇清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5个柱体积。


6.注意事项:


1)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。


2)本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃。


3) 2-25℃,常压,避光运输。


4)仅供科研实验使用。


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