H+K+ -ATP 酶活力测试盒 检测服务

H+K+ -ATP 酶活力测试盒

二、样本前处理

准确称取胃粘膜组织重量，按重量（g）:体积（mL）=1:9

的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件下制备成 10%

的组织匀浆液，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液，再用生

理盐水 5 倍稀释成 2%的浓度待测。

六、测试原理：

ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及无机磷，测定无机磷

的量可判断 ATP 酶活力的高低。H ＋K ＋ -ATP 酶是一种能被

钾专一激活而不被乌本苷抑制的 ATP 酶。

七、注意事项：

1、具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要

求严格，要没有一点磷，若试管放过磷酸或磷酸缓冲液，

一定要洗得非常干净，即先用洗洁精加水煮，再用自来

水冲，最后用双蒸水冲干净。最好用一次性塑料管或新

玻璃管，避免磷污染是检测成败的关键。

2、定磷剂配好后，不可放置太久，一般保存 1～5 天，最好

现用现配。随时放冰箱。

3、最好采用先配 A、B 两种混合液，然后按简化操作步骤

检测。这样快捷、准确。

4、所有配试剂的器皿均要专用，包括吸硫酸的吸管及盛水

的器皿。

八、测定意义：

H ＋K ＋ -ATPase 对胃酸的分泌及胃的消化功能具有重要

的生理意义，70 年代 Forte 等人首先在牛蛙的胃粘膜上分

离出一类能被 K ＋专一激活而不被乌本苷抑制的 ATPase 即

H ＋K ＋ -ATPase，随后 Lee·j 等人又证明了含有该酶的膜囊泡

运动跨膜运输质子的作用，从而为胃酸分泌的机理奠定了

分子学基础，H ＋K ＋ -ATPase 定位于胃粘膜壁细胞（Parietal

lell）上，属于第二类质子泵，它通过自身的磷酸化（E1→E2）

与去磷酸化（E2→E1）完成的 H ＋ /K ＋电中性（electroneutral）

跨膜离子转运，不断将壁细胞内的质子运输到膜外行使泌

酸的功能。

H+K+ -ATP 酶活力测试盒