溶-菌酶（LZM）测定试剂盒，在一定浓度的混浊菌液中，由于溶-菌酶能水解细菌细胞壁上肽聚糖使细菌裂解而浓度降低，透光度增强，故可以根据透光度变化来推测溶-菌酶的含量。

溶-菌酶（LZM）测定试剂盒

（比浊法）

本所比浊法测定溶-菌酶活性方法主要有三种：

1、自身对照法（附录 I）：适用于样本数量较少，或者样本有混浊或有颜色（如血液红色、匀浆液浊度等）；

2、空白对照法（附录 II）：适用于样本量多且样本比较澄清透明；

3、标准曲线法（附录 III）：适用范围同空白对照法。

一、测定原理：

在一定浓度的混浊菌液中，由于溶-菌酶能水解细菌细胞

壁上肽聚糖使细菌裂解而浓度降低，透光度增强，故可以根

据透光度变化来推测溶-菌酶的含量。

二、试剂组成及配制 (30T/28 样)

1、试剂组成：

试剂一：菌粉，5mg×4 支，2～8℃干燥保存，有效期 6 个月。

试剂二：菌粉溶剂，100mL×1 瓶，2～8℃保存，并每月放

微波炉中温消毒 20 秒，有效期 6 个月。

试剂三：标准品，粉剂 2mg×1 支（活力为 8 万单位/mg），2～

8℃干燥保存，有效期 6 个月。

[注]：试剂盒严格按照上述方法保存有效期可延至一年。

2、试剂配制：

（1）、贮备菌液的配制：

取 5mg/支的菌粉 1 支，倒入匀浆管中，加菌粉

溶剂 1mL，轻轻缓慢上下旋转研磨 3 分钟（切勿溅

出），即为贮备菌液，将其取出后置 2～8℃冰箱密

封保存一周左右。

（2）、应用菌液的配制：

按贮备菌液:菌粉溶剂=1:19 进行配制，需多少配

多少。剩下的应用菌液 2～8℃可保存一周左右。最

好是现用现配，用时摇匀。

（3）、标准品的配制：

①、标准品贮备液的配制：

每支准确加双蒸水 1.0mL 配成 2mg/mL 的标准品

贮备液。2～8℃可保存 7～10 天。

②、标准品应用液的配制：

临用时按标准品贮备液∶双蒸水=1∶799 比例稀

释成 2.5µg/mL（即 200U/mL）的标准品应用液，需多

少配多少。2～8℃保存，可保存 7～10 天。

附录Ⅰ：自身对照法测定溶-菌酶

（适用于样本数量较少，或者样本有混浊或有颜色，如血液红

色、组织匀浆等）

[注]：本法用分光光度计 530nm 处,1cm 光径比色皿测得必须是

透光度值。

1、操作步骤

①、将配制好的应用菌液，标准应用液及所需检测的样本均

放入 37℃水浴箱中预温 5 分钟以上。使菌液，标准液

及检测样本的温度达到 37℃。

②、将可见分光光度计于 530nm 处,1cm 光径比色皿,以双蒸

水调透光度 100 % (比色皿准备两只,一只用于调透光度

100 %,一只用于测定)。

③、往相应编号的试管中加入 0.2mL 待测样本，取 2mL 应

用菌液迅速冲入试管中，立即混匀并计时。(标准品应

用液取 0.2mL,加入 2mL 应用菌液,其它操作与测定相同)

④、迅速倒入比色皿中在可见分光光度计 530nm 处比浊，

15 秒时读取透光度值 T0, 比色皿不要取出，在 2 分 15

秒时读取透光度值 T2；

⑤、求出 2 次透光度的差值（△T= T2-T0）。

[注 1]：用同一比色皿每检测一个样本后均要用双蒸水冲洗

干净，才可再放第二个样本或标准品应用液。

[注 2]：当测定管△T 大于 15 时，请将样本稀释后再测。

溶-菌酶（LZM）测定试剂盒