辅酶IINADP(H)含量测试盒 生化试剂
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辅酶IINADP(H)含量测试盒,分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用使氧化型唾哇蓝 (MTT) 还原为甲,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP为NADPH,从而检测NADP*含量。
辅酶IINADP(H)含量测试盒
(规格:50T/24 样 分光光度法)
一、测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用使氧化型唾哇蓝 (MTT) 还原为甲,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP为NADPH,从而检测NADP*含量。
二、仪器设备(自备)
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
三、试剂组成:(50T/24 样)
酸性提取液:50mlx1 瓶,4C保存:
碱性提取液:50mlx 瓶,4C保存:
试剂一:液体15 mlx1 瓶,4C保存:
试剂二: 粉剂x1 支,-20C保存,用时加入4ml 蒸留水,混匀:用不完的试剂4C保存一周:试剂三:粉剂x1 支,-20C保存,用时加入4ml 蒸馏水,混匀:用不完的试剂4C保存一周试剂四:粉剂x1 支,4C保存,用时加入4ml 蒸馏水,混匀: 用不完的试剂4C保存一周:
试剂五;液体1.8mlx1 支,4 C保存:
试剂六:液体30mlx1 瓶,4 C保存:
试剂七:液体50mlx1 瓶,4 C保存
四、操作步骤
NADP+和NADPH的提取:
详见试剂盒内说明书关于样本处理的说明。测定组织、细菌和细胞时需要测定蛋白浓度。可用本所的A045-2总蛋定测试盒(考马斯亮蓝法)或A045-3、A045-4总蛋白定量测试盒(BCA法)进行蛋白浓度的测定。
辅酶IINADP(H)含量测试盒