黄-嘌呤氧化酶(XOD)测定试剂盒
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黄-嘌呤氧化酶(XOD)测定试剂盒,主要存在于哺乳动物的乳汁及肝脾中,属需氧脱氢酶类,是体内核酸代谢中的重要酶,在肝细胞损伤时,此酶早于 SGPT 释放于血清中,并且升高明显。
黄-嘌呤氧化酶(XOD)测定试剂盒
(比色法)
一、测定意义:
黄-嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase XOD)主要存在于哺
乳动物的乳汁及肝脾中,属需氧脱氢酶类,是体内核酸代
谢中的重要酶,在肝细胞损伤时,此酶早于 SGPT 释放于
血清中,并且升高明显,其对鉴别肝细胞性黄疸及阻塞性
黄疸有明显的测定意义,并且在缺氧过程中黄-嘌呤脱氢酶
很快形成黄-嘌呤氧化酶,其对自由基的产生起了重要作用。
二、测试原理:
XOD 可催化次黄-嘌呤生成黄-嘌呤,与此同时产生超
氧阴离子自由基,当有电子受体及显色剂存在的情况下,
生成紫红色结合物,根据后者生成量的多少可以推算出
XOD 的活力。
三、试剂组成与配制:(50 管/48 样)
试剂一:液体 20mL×3 瓶,-20℃以下冷冻保存 3 个月,用
时根据需要量取出室温融化或 37℃水浴融化。
试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 个月。
试剂三:黄色液体 6mL×2 瓶, 4℃避光保存 3 个月。
试剂四:粉剂×2 支,稀释液 0.6mL×2 支, -20℃以下冷冻
保存 6 个月,临用前取 4 号稀释液 0.6mL 稀释 4
号粉剂一支,稀释好的 4 号试剂-20℃以下冰箱或
冰室保存。尽量避免反复冻溶。(注:试剂四粉剂
本身量较少,可能会附着于管壁或盖子内(并非空
管),可 4000 转/分钟离心 2 分钟后再用稀释液溶
解)
试剂五:终止液 60mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 个月。
四、操作步骤:
1、样本前处理:
①、血清(浆):
血清可直接取样进行检测;血浆需以 3000~3500 转/
分,离心 10 分钟,小心吸取澄清的上清进行检测。若仍
有混浊可反复离心;
②、红细胞:
抗凝全血以 1000 转/分,离心 10 分钟,弃上层血清,
取下层红细胞按 1︰49 的比例加双蒸水制成溶血液待测。
配好的溶血液最好当天做检测,4℃存放时间不超过 8 小
时;
③、组织:
准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9 的比例
加入 9 倍体积的匀浆介质(推荐 0.86%或 0.9%的生理盐
水 ), 冰 水 浴 条 件 下 , 机 械 匀 浆 , 制 备 成 10% 的 匀 浆
液,2500~3000 转/分钟,离心 10 分钟,取上清液进行测定。
五、参考取样量(a*):
血清 50~100μL;1︰49 溶血液 50μL;10%肝组织匀浆
20μL~100μL。
七、注意点:
1、试剂一、试剂四放-20℃保存,尽量避免反复冻溶,如要
多次使用,请在第一次解冻(或试剂四配好)后分装好
再保存。
2、组织块要用生理盐水漂洗后,滤纸吸干,-20℃以下可保
存 3 个月以上。
3、血浆中 XOD 的检测:血浆在检测过程中易引起混浊,需
在测试前以 3000~3500 转/分,离心 10 分钟,小心吸取
澄清的上清,弃去上层脂肪与下层沉淀,若仍有混浊可
反复离心。
黄-嘌呤氧化酶(XOD)测定试剂盒