全血乳酸（Lactic Acid LD）测定试剂盒 生化试剂

全血乳酸（Lactic Acid LD）测定试剂盒

（测全血）

一、测定原理：

以 NAD+为氢受体，LDH 催化乳酸脱氢产生丙酮酸，使

NAD+转化成 NADH。其中 PMS 递氢使 NBT 还原为紫色呈

色物，呈色物的吸光度在 530nm 时与乳酸含量成线性关系。

二、试剂组成及配制（50 管/48 样）：

蛋白沉淀剂：溶液 50mL×1 瓶，室温保存 6 个月，如有结晶，

则取上清进行实验。

试剂一：酶稀释液 60mL×1 瓶，4℃～8℃冰箱保存 6 个月。

试剂二：酶贮备液 0.6 mL×1 支, 4℃～8℃冰箱保存 6 个月；

用时用一次性吸头进行取样。

酶工作液的配制：临用前将试剂二（酶贮备液）和试剂一

（酶稀释液）按照 1︰100 的体积比进行混合，现 用

现配，4℃保存 24 小时内有效；

试剂三：显色溶液 6 mL×2 瓶， 4℃～8℃避光冰箱保存 6

个月。

试剂四：粉剂×2 支，短期内使用可放 4℃～8℃冰箱，长

期（6 个月）存放请置-20℃以下。(注:粉剂量较少,

可能附着于管壁或盖子上,并非空管,如使用时肉眼

不可见,可将其 4000 转/分钟离心 2 分钟后使用)

显色剂的配制：取 1 瓶试剂三，转移 1mL 进入一支试剂四

粉剂中, 反复颠倒离心管混匀,待粉剂溶解后，再用

微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，再从这

瓶试剂三中移出 1mL 到原试剂四离心管中，如此反

复 2～3 次，使二者充分混合溶解，配成显色剂，

2℃～8℃避光保存 2 周内有效。

试剂五：终止液，60 mL×2 瓶， 4℃～8℃冰箱保存 6 个月。

试剂六：3mmol/L 标准液，2 mL×1 支， 4℃～8℃冰箱保

存 6 个月。

三、操作步骤：

1、前处理：

上清液制备：取待测样本 0.1mL,加入蛋白沉淀剂 0.6mL 混

匀，3500～4000 转/分，离心 10 分钟，取上

清液进行测定。

[注]: 1、全血及时用蛋白沉淀剂制备成乳酸上清液。

2、制成的乳酸上清冰箱 4℃或者 0℃以下保存，

15～30 天稳定不变。

3、如果您的血样很少，您可以取 0.05mL 全血加

0.3mL 蛋白沉淀剂。

五、注意点：

1、应取空腹或静止状态下的静脉血，并避免血液淤滞，如

用止血带，应在针头刺入静脉后马上放开，然后等 2 分

钟后再抽血。

2、血液要新鲜，最好是当天完成，如果当天完不成，可将

样本进行样本前处理后，将上清液 4℃或-20℃保存可稳

定 15～30 天。

3、蛋白沉淀剂如有结晶, 则取上清进行实验。

4、在批量实验前需要进行预实验，以确定测定绝对 OD（测

定 OD 值-空白 OD 值）在 0.05～0.35 之间。如果测定绝

对 OD 小于 0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果

测定绝对 OD 大于 0.35，则需要将样本稀释后重新测定。

附录Ⅰ：乳酸标准曲线的制备

1、前处理：

将 6mmol/L 的乳酸标准用双蒸水稀释成不同浓度：

1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L、6mmol/L，

进行标准曲线的制备。（标准曲线仅供参考，用户可以不做，

而且 6mmol/L 标准液本试剂盒不提供，如有需要请咨询本公

司）

全血乳酸（Lactic Acid LD）测定试剂盒