谷-胱甘肽还原酶活性系数测试盒 生化试剂

谷-胱甘肽还原酶活性系数测试盒

（GRAC 100T/48 样）

一、试剂组成及配制：

试剂一：缓冲液，32mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：底物贮备液，0.22mL×1 瓶，-20℃避光保存。

底物稀释液，2.2 mL×1 瓶，-20℃保存。

底物应用液的配制：临用前按底物贮备液：底物稀释液=1:9

的比例 10 倍稀释，制备成底物应用液，用不完的

应用液三天内 4℃保存，三天以上-20℃保存。

试剂三：基质粉剂×2 支，-20℃避光保存。

基质稀释液，2.5mL×2 瓶，-20℃保存。

基质应用液的配制：临用前将 1 支基质粉剂加入到 1 瓶基质

稀释液中充分溶解，制备成基质应用液，用不完

的应用液三天内 4℃保存，三天以上-20℃保存。

试剂四：促进剂粉剂×2 支，-20℃避光保存。

促进剂稀释液，1.3mL×2 瓶，-20℃保存。

促进剂应用液配制：临用前将 1 支促进剂粉剂加入到 1 瓶促

进剂稀释液中充分溶解，制备成促进剂应用液，用

不完的应用液三天内 4℃保存，三天以上-20℃保

存。

试剂五：沉淀剂，40mL×2 瓶，4℃保存。

试剂六：显色剂粉剂×2 支，4℃避光保存。

显色剂稀释液，50mL×2 瓶， 4℃避光保存。

显色剂应用液的配制：临用前将 1 支显色剂粉剂加入到 1

瓶显色剂稀释液中充分溶解，制备成显色剂应用

液，4℃避光保存。

四、测定原理：

谷-胱甘肽还原酶（GR）在有还原型辅酶Ⅱ存在的条件

下，可催化氧化型谷-胱甘肽（GSSG）还原为还原型谷胱甘

肽（GSH），该酶的辅基为黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）。因

此, 当核黄素缺乏而导致FAD不足时, 则可使此酶的活性下

降。通过测定谷-胱甘肽还原酶活性系数来评价机体核黄素的

营养状况。

五、检测意义：

核黄素在体内以FAD的形式与酶蛋白结合成各种黄素

蛋白, 作为电子转移系统参与氧化还原过程。核黄素缺乏时,

产生皮肤、粘膜和眼部等一系列的症状。为了早期发现核黄

素缺乏, 及时采取防治措施, 有必要进行核黄素营养状况的

评定。

核黄素缺乏时, 谷-胱甘肽活性系数迅速增高, 而补充核

黄素后就降为正常。故谷-胱甘肽还原酶活性系数

（Glutathione Reductase Activation Coefficient, GRAC）是评

定核黄素慢性缺乏时体内核黄素总水平的准确指标。应用谷

胱甘肽还原酶活性系数（GRAC）的值评价核黄素营养状况

具有灵敏、稳定、准确、微量、能反映体内代谢利用情况等

优点。

附录 I：全血中谷-胱甘肽还原酶活性系数的测定

一、样本前处理：

取新鲜全血样本 10μL 加入双蒸水 990μL，漩涡混匀 1

分钟使溶血，制备成 100 倍稀释的溶血液按前 Ian 的操作表

加样。（对光看一下是否透亮，若不透亮，有浑浊，则 4000

转/分，离心 5 分钟，取上清液测定即可）

附录Ⅱ：血清中谷-胱甘肽还原酶活性系数的测定

一、样本前处理：

取血清样本 200μL 加入 600μl 生理盐水，即按 1:3 进行

稀释后按操作表加样。

附录Ⅲ：组织中谷-胱甘肽还原酶活性系数的测定

一、样本前处理：

准确称取组织重量，按重量（g）:体积（mL）=1:9 的比

例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰水条件下制备成 10%的组

织匀浆，3500 转/分，离心 10 分钟，取上清液，再用生理盐

水 5 倍稀释后制备成 2%组织上清液按操作表加样。

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