糜-蛋白酶测试盒 生化试剂

糜-蛋白酶测试盒 

一、测定意义：

糜-蛋白酶又称胰-凝乳蛋白酶(Chymotrypsin)，系从牛或猪胰中提取的一种蛋白水解酶，具有肽链内切酶的作用，通过切断蛋白质肽链中酪-氨酸、苯丙-氨酸的羧端肽链作用，专一水解羧端芳香族氨基酸(酪-氨酸、色-氨酸、亮-氨酸)或侧键大体积疏水性残基甲-硫氨酸等。可以分解炎症部位纤维蛋白的凝结物，促进血凝块、脓性分泌物及坏死组织的溶化分解，从而净化创面，使肉芽组织新生，促进伤口愈合。其在眼科、皮肤科做临床局部应用已被肯定，也可用于创口或局部炎症，以减少局部分泌和水肿。近年来随着临床药理学研究的不断发展．其临床应用范围也日渐广泛。

二、测定原理：

以酪蛋白为底物，糜-蛋白酶可水解蛋白产生含酚的氨基酸，而酚试剂可被含酚的氨基酸还原成蓝色物质，通过比色可测定糜-蛋白酶活力。

三、试剂盒组成与配制：（50 管/24 样）

试剂一：液体 24mL×1 瓶，4℃保存 3 个月。

试剂二：液体 6mL×2 瓶，4℃保存 1 个月。

试剂三：液体 100mL×1 瓶，4℃保存 3 个月。

试剂四：液体 9mL×2 瓶， 4℃避光保存 2 个月。

试剂五：1mg/mL 酪-氨酸标准品贮备液 1mL×1 瓶，标准品稀释液 20mL×1 瓶，4℃保存 1 个月。

50μg/mL 标准应用液的配制：取 1mg/mL 标准品贮备液 50μL 用标准品稀释液稀释至 1mL，即 1︰19（体积比）稀释，充分混匀后，4℃可保存 10 天以上。

试剂六：匀浆介质 60mL×2 瓶，4℃保存 1 个月。

四、操作步骤：

1、样本前处理：、

组织样本：准确称取组织重量，按重量（g）:体积(mL)=1:9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介质，冰水浴条件下机械匀浆，制成 10%的组织匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液进行预试后根据活力大小或直接进行检测或用匀浆介质进行适当稀释后测定。（预试结果请参考附录中的标准曲线）

2、样本及试剂在测试前均要平衡至室温（室温在 20℃以上可放置室温；室温在 20℃以下，可将试剂置于 37℃水浴中预温 10 分钟）。

 糜-蛋白酶测试盒