高密度脂蛋白胆-固醇测试盒（ 直接法），准确称取组织重量,按重量(g)：体积(mL)=1：9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介质，冰水浴条件下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液待测。

高密度脂蛋白胆-固醇测试盒（ 直接法）

（ 直接法 分光光度计法）

一、操作过程:

1、样本处理:

①、血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀

释后测定。

②、培养液样本：吸取培养液，1000 转/分，离心 10 分钟，

取上清测定。[注]：一般建议细胞密度在 100 万个/mL

以上。

③、组织样本：准确称取组织重量,按重量(g)：体积(mL)=1：

9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介质，冰水浴条件下

机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液待测。

[注]:如组织样本为非高脂样本，匀浆介质统一用磷酸

盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取;如组

织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆介质可统

一用无水乙醇进行提取。

④、细胞样本：

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000 转/分，

离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用等渗缓

冲液（推荐 0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液）

清洗 1～2 次，同样 1000 转/分，离心 10 分钟，弃

上清液，留细胞沉淀；

B、细胞破碎:加入 0.2～0.3mL 的匀浆介质（推荐

0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水）

进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率：300W,3～

5 秒/次，间隔 30 秒，重复 3～5 次)或手动匀浆，

制备好的匀浆液不离心待测。也可采用裂解液裂解

(推荐 TritonX-100，1～2%，裂解 30～40 分钟)，

裂解好的液体不离心直接测定。[注]：建议细胞密

度在 100 万个/mL 以上。破碎好的液体可显微镜观

察细胞是否破碎

五、性能指标：

1、试剂空白管吸光度≤0.10。

2、线性范围：0～5.16mmol/L，r 2＞0.990。

3、灵敏度：测试 1.00mmol/L 被测物时，吸光度值△A 大于

0.04。

4、准确度：相对偏差≤10%。

5、精密度：CV≤3%，批间相对极差≤5%。

6、稳定性：原包装试剂盒在 2℃～8℃避光保存，有效期为

12 个月。开启后 2℃～8℃避光保存，可稳定一

个月。

六、注意事项:

1、本产品仅用于科研，不得用于临床诊断，切勿服用。

2、样品含量如超出检测范围，可用生理盐水稀释样

本后进行测定，测定结果乘以稀释倍数。

3、试剂防止葡萄糖、胆-固醇等试剂的污染。

4、试剂与样本量可按照仪器要求，按比例增减。

5、样本中 HDL-C 含量较低时，可以加大样本取样量（如取

10μL 或 20μL，同时标准品需要稀释相应的倍数后和样

本取样量一致）后测定。

6、标准品粉剂为冻干粉，溶解时间较长，配置时可提前半

小时配制。

七、参考文献：

1、Nader Rifai,Thomas G.Cole,Elizabeth lannotti.

Clin.Chem.JuL 1998;44:1452-1458.

2 、 Y Okamoto, S Tanaka,H Nakano.Clin.Chem. Dec

1995;41:1784.

八、参考值：

大鼠血浆：0.45±0.16mmol/L

小鼠血浆：0.92±0.11 mmol/L

鸡血浆：0.36±0.12（某些种类的能达到 2.33±0.38）mmol/L

鱼血浆：0.99±0.22 mmol/L

小鼠肝脏：12.4±2.0 μmol/gprot

鱼肝脏：39.36±12.37μmol/gprot

注：以上值仅供参考，并无临床学意义。

高密度脂蛋白胆-固醇测试盒（ 直接法）