谷-氨酸脱氢酶（GDH）测试盒 生化试剂

谷-氨酸脱氢酶（GDH）测试盒

( Glutamate dehydrogenase 分光光度法)

测定原理：

谷-氨酸脱氢酶 (Glutamate dehydrogenase，GDH)催化 NH4、a -酮戊二酸和 NADH，生成谷-氨酸和NAD，引起 340nm吸光度值下降:通过测定 34nm 处吸光度的下降速率，计算 GDH活性。

自备仪器或用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml 石英比色皿、研钵、蒸馏水。

粗酶液提取:

粗酶液提取详见试剂盒内说明书。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用本所的A045-2总蛋白定测试(马斯亮法 A045-3A0454 定测(BCA 法进行蛋白浓度的测定。

操作步骤:

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零

2、样本测定:

(1) 工作液配制: 将试剂二中加入试剂一 50ml 混合解，置于恒温水浴锅预温(哺乳动物37C:非哺乳动物 25C) 5min，现用现配

(2)测定: 取 0.95ml 工作液和 0.05ml 待测粗酶液于试管中，混匀并立即转入 1ml 比色于波长 340nm 测得 20 秒时吸光度值 A1 和5 分钟 20 秒时的吸光度值 A2，计算A=A1-A2。(将样本加入工作液中即进行计时)

谷-氨酸脱氢酶（GDH）测试盒