山-梨醇脱氢酶检测试剂盒，SDH（EC 1.1.1.14）催化山-梨醇脱氢生成果糖，是调控生物体内山-梨醇含量的关键酶之一。

山-梨醇脱氢酶检测试剂盒

（ Sorbitol dehydrogenase，SDH 分光光度法）

一、测定意义：

SDH（EC 1.1.1.14）催化山-梨醇脱氢生成果糖，是调

控生物体内山-梨醇含量的关键酶之一。

二、测定原理：

SDH催化山-梨醇脱氢生成果糖，同时还原NAD+生成

NADH，测定340nm吸光度增加速率可以计算SDH活性。

三、仪器设备（自备）：

可调式移液器、水浴锅、台式离心机、紫外分光光度

计、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

四、试剂组成：（50T/48 样）

提取液：液体60mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体20mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入15mL蒸

馏水，用不完的试剂仍4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入15mL

蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存。

五、操作步骤：

1、粗酶液提取：

⑴、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离

心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4个）：提取

液体积（mL）500～1000：1的比例（建议500万细菌

或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰

浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10 秒，重复30

次）；8000g，4°C离心10min，取上清，置冰上待测。

⑵、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)1：5～

10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）

进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清置冰

上待测。

⑶、血清（浆）样品：直接检测。

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