甘油含量 (Glycerol)测定试剂盒，在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化为 3-磷酸甘油，再被甘油磷酸氧化酶氧化产生*:在*酶作用下生色底物转化为苯醒亚胺，光密度值与甘油浓度成正比。

甘油含量 (Glycerol)测定试剂盒

（适用于做组织样本）

测定原理:

在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化为 3-磷酸甘油，再被甘油磷酸氧化酶氧化产生*:在*酶作用下生色底物转化为苯醒亚胺，光密度值与甘油浓度成正比。

所需设备：

酶标仪、可见光分光光度计 (721、722 型)、生化分析仪。

操作过程：

1、样本处理:详见说明书或本公司-技术文章部分关于样本处理的说明。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用本所的 A045-2 总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者 A045-3、A045-4 总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。

2、标准品稀释

用蒸馏水、生理盐水或与样品缓冲液一致的液体，将 4mM 甘油标准品倍比稀释为1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 mol/L，通常 4~6 管即可，注意设置 0 浓度对照反应管。

计算：

1、绘制标准曲线并计算甘油浓度。Excel 作图步骤: 各标准管 OD 值为y轴，标准品浓度为x轴。 鼠标左键圈住数据，点击做图向导，选择-散点图-，点击-完成-。@ 鼠标右键点图上的某一点，点击-添加趋势线-，点击-选项-，点击-显示公式-和-R2值-。

2、以 mg 蛋白浓度或细胞数校正甘油含量。

甘油含量 (Glycerol)测定试剂盒