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超氧化物歧化酶(SOD)分型测定试剂盒2

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超氧化物歧化酶(SOD)分型测定试剂盒2,对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,此酶能清除超氧阴离子自由基(O2- ·)保护细胞免受损伤。

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超氧化物歧化酶(SOD)分型测定试剂盒2

(抽提法测 T-SOD CuZnSOD Mn-SOD 比色法)

【试剂盒介绍】

本试剂盒采用黄-嘌-呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶

(Superoxide Dismutase SOD)活力,可测血清()、脑脊液、胸水、

腹水、肾透析液、尿液、红细胞、白细胞、血小板、心肌培养

细胞、肿瘤培养细胞、各种动植物组织细胞及亚细胞水平(线粒

体、微粒体)中的 SOD 活力,并可检测微生物、药物、食品、

饮料、化妆品中的 SOD 活力。

【测定意义】

超氧化物歧化酶(SOD)对机体的氧化与抗氧化平衡起着

至关重要的作用,此酶能清除超氧阴离子自由基(O2 ·)保护细

胞免受损伤

【测定原理】

通过黄-嘌-呤及黄-嘌-呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由

基(O2 ·),后者氧化羟胺形成亚硝酸盐,在显色剂的作用下呈

现紫红色,用可见光分光光度计测其吸光度。当被测样品中含

SOD 时,则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用,使形成

的亚硝酸盐减少,比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光

度值,通过公式计算可求出被测样品中的 SOD 活力。

高等动物细胞内只有二种 SOD 即铜锌-SODCuZn-SOD

与锰-SOD(Mn-SOD),二者相加等于总 SODT-SOD),经样本前

处理过的样本中 Mn-SOD 活力丧失,但 CuZn-SOD 活力不变。

【有效期和保存条件】

本试剂盒保存期:6 个月;贮存温度:4℃,注意 4 号贮备

液须放在-20℃以下,温度偏高酶容易失效,所用塑料吸嘴尖要

干净,最好消毒,或者用双蒸水将新吸嘴尖头反复冲洗,一定

要避免菌类及重金属离子污染。

【实验中所需的仪器和自备的试剂】

550nm 的分光光度计或酶标仪、37℃恒温水浴或气浴箱、

台式离心机、移液器、双蒸水、冰醋酸(分析纯,乙酸浓度

≥99.5%)。

【试剂组成与配制】

1、(50 /24 样,货号 A001-2-1)试剂的组成与配制:(如您

只需做 CuZn-SOD 则可做到 48 样)

试剂一:贮备液:5mL×1 瓶(天冷时或放冰箱会有部分结晶

析出,需 37℃加热溶解后再用);试剂一应用液的

配制:用时每瓶 5mL 贮备液加双蒸水稀释至 50mL

4℃可保存 1 年。

试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。

试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。

试剂四:贮备液:350μL×1 支,-20℃以下保存(如需多次使用,

请在第一次解冻后分装保存);稀释液:5mL×1 瓶,

4℃可保存 6 个月。试剂四应用液的配制:用时按贮

备液:稀释液=114 比例配制,用多少配多少,现用

现配。

试剂五:粉剂×1 支,用时加入双蒸水 37.5mL(可在液面位置

标记一下)加热至 70℃~80℃溶解后备用,若加热过

程中水分蒸发减少,此时必须用双蒸水补充至标记

处,配好后的试剂避光 4℃可冷藏 1 年。

试剂六:粉剂×1 支,用时加入双蒸水 37.5mL 溶解后备用,配好

后试剂避光 4℃冷藏可保存 6 个月。

显色剂的配制:按试剂五:试剂六:冰醋酸=3:3:2 的体积比配显

色剂,用多少配多少,配好的显色剂 4℃可避光冷藏

3 个月。

试剂七:20mL×1 瓶;4℃冷藏可保存 6 个月。

2、(100 /48 样,货号 A001-2-2)试剂的组成与配制:(如

您只需做 CuZn-SOD 则可做到 96 样)

试剂一:贮备液, 10mL×1 瓶(天冷时或放冰箱会有部分结

晶析出,需 37℃加热溶解后再用);试剂一应用液的

配制:用时每瓶 10mL 贮备液加双蒸水稀释至

100mL4℃可保存 1 年。

试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。

试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。

试剂四:贮备液 350μL×2 支,-20℃以下保存(如需多次使用,

请在第一次解冻后分装保存);稀释液 10mL×1 瓶,

4℃可保存 6 个月。试剂四应用液的配制:用时按贮备

:稀释液=114 比例配制,用多少配多少,现用现

配。

试剂五:粉剂×1 支,用时加入双蒸水 75mL(可在液面位置标

记一下)加热至 70℃~80℃溶解后备用,若加热过程

中水分蒸发减少,此时必须用双蒸水补充至标记处,

配好后的试剂避光 4℃可冷藏 1 年。

试剂六:粉剂×1 支,用时加双蒸水 75mL 溶解后备用,配好后试

剂避光 4℃冷藏可保存 6 个月。

显色剂的配制:按试剂五:试剂六:冰醋酸=3:3:2 的体积比配显

色剂,用多少配多少,配好的显色剂 4℃避光可冷藏

3 个月。

试剂七:30mL×1 瓶;4℃冷藏可保存 6 个月。

【样本前处理】

1、取样本 0.2mL 加试剂七 0.2mL,旋涡混匀器充分混匀 1

钟后,以 35004000 /分,离心 15 分钟(台式离心机),

取上清进行 CuZn-SOD 测定。此上清液即经过处理后的样

本,Mn-SOD 活力丧失而 CuZn-SOD 活力不受影响。

2、同时取生理盐水 0.2mL 加试剂七 0.2mL,旋涡混匀器充分

混匀 1 分钟后,以 35004000 /分,离心 15 分钟(台式

离心机),取上清作 CuZn-SOD 对照。

注:如样本量不够可按比例减少样本和试剂用量。

超氧化物歧化酶(SOD)分型测定试剂盒2

 

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