高铁血红蛋白（MetHb）测试盒 生化试剂

高铁血红蛋白（MetHb）测试盒

一、试剂组成及配制：（50T/48 样）

试剂一：血红蛋白测定浓缩液 1mL×2 支，2～8℃保存。

血红蛋白测定应用液的配制：临用前将浓缩液用双蒸水

1∶99 稀释，即 100 倍稀释，现用现配。配好

的试剂 2～8℃避光保存，可存放 1 个月以上。

试剂二：高铁血红蛋白测定浓缩液，30mL×1 瓶，2～8℃

保存。

高铁血红蛋白测定应用液的配制：浓缩液∶双蒸水＝

1∶9 稀释，即 10 倍稀释，可存放 6 个月以上。

试剂三：制作还原血红蛋白曲线用

①、白色粉剂×1 支，2～8℃避光保存。

②、稀释液，1mL×1 支，2～8℃保存。

试剂三应用液配制：临用前每支粉剂加入 1mL 稀释液，

现用现配，注意避光。

试剂四：制作高铁血红蛋白曲线用

①、砖红色粉剂×1 支，2～8℃避光保存

②、稀释液，1mL×1 支，2～8℃保存。

试剂四应用液配制：临用前每支粉剂加入 1mL 稀释液，

现用现配，注意避光。

二、试剂组成及配制：（100T/96 样,货号 A102-1-2）

试剂一：血红蛋白测定浓缩液 1mL×4 支，2～8℃保存。

血红蛋白测定应用液的配制：临用前将浓缩液用双蒸水

1∶99 稀释，即 100 倍稀释，现用现配。配好的

试剂 2～8℃避光保存，可存放 1 个月以上。

试剂二：高铁血红蛋白测定浓缩液，60mL×1 瓶，2～8℃

保存。

高铁血红蛋白测定应用液的配制：浓缩液∶双蒸水＝

1∶9 稀释，即 10 倍稀释，可存放 6 个月以上。

试剂三：制作还原血红蛋白曲线用

①、白色粉剂×1 支，2～8℃避光保存。

②、稀释液，1mL×1 支，2～8℃保存。

试剂三应用液配制：临用前每支粉剂加入 1mL 稀释液，

现用现配，注意避光。

试剂四：制作高铁血红蛋白曲线用

①、砖红色粉剂×1 支，2～8℃避光保存

②、稀释液，1mL×1 支，2～8℃保存。

试剂四应用液配制：临用前每支粉剂加入 1mL 稀释液，

现用现配，注意避光。

三、操作步骤：

1、制备抗凝全血：取全血立即加入到肝素抗凝管内，加

盖封口，轻轻颠倒混匀。

2、血红蛋白含量的测定：取 0.01mL 全血与 2.5mL 的 100

倍稀释的试剂一应用液（血红蛋白测定应用液），混

匀，静置 5 分钟后，1cm 光径，双蒸水调零，540nm

处测定各管吸光度值。

3、高铁血红蛋白测定： 取 0.05mL 全血，加入 2.5mL

的试剂二稀释应用液（即高铁血红蛋白测定应用液），

混匀，静置 5 分钟后，1cm 光径，双蒸水调零，测定

630nm 处及 602nm 处吸光度值。如果没有双波长的

分光光度计则可以先测定各管 630nm 处吸光度值，

然后再测各管 602 nm 处吸光度值。但一定要注意各

管的编号不要弄错。

五、注意事项：

①、取血后应在 1 小时内完成实验，否则影响测定结果，

因为红细胞中的还原酶可使高铁血红蛋白逐渐还

原，使结果降低。但可放-20℃以下冷冻保存，如果

血样较多，可将全血分成几小管，每次测试可取其

一小管，余下各管仍保存-20℃以下以备重复测试，

其结果不受影响。

②、本实验可用双波长分光光度计测定，可同时测定

602nm 处及 630nm 处吸光度值，进行计算。也可用

单波长分光光度计测定，可以先测定各管 630nm 处

吸光度值，然后再测各管 602 nm 处吸光度值。但

一定要注意各管的编号不要弄错。

③、如果您实验室分光光度计没有双波长扫描功能，可

以不做标准曲线，直接用本所实验室 R 与 r 均为常

数，R=1.81；r=0.14。

④、所用器皿要干净。

七、检测意义：

体内一氧化氮弥散入血后，很快与氧合血红蛋白结合形

成高铁血红蛋白（methemoglobin，MetHb），NO 与 MetHb 变

化相关，故全血 MetHb 检测近年来受到临床的广泛重视。同

时血液中高铁血红蛋白含量的测定对接触芳香族氨基、硝基

化合物所引起的中毒性疾病的诊断与治疗，有重要的意义。

八、测定原理：

高铁血红蛋白在 630nm 波长处有一特征吸收峰，而高铁

血红蛋白（MetHb）和还原血红蛋白（Hb）在 602nm 波长处

光密度值相等，利用此关系可以通过相应的公式算出高铁血

红蛋白含量。

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