疟原虫染色液(吖淀橙) 生化试剂

疟原虫染色液(吖淀橙)

产品简介:

抱子虫无明显运动细胞器，全部发育阶段均营寄生生活。生活史较复杂，有无性的裂体增殖、抱子增殖和有性的配子生殖两种生殖方式，并可以在同一个宿主或分别在两个不同宿主体内完成。寄生于人体的抱子虫主要有疟原虫、刚地弓形虫、卡氏肺跑子虫、隐抱子虫等。

疟原虫是营寄生生活的抱子虫，主要寄生于人及多种哺乳动物，少数寄生于鸟类和爬行类动物，目前已知有 130 余种。寄生于人体的疟原虫主要有间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫等。疟原虫的基本结构包括胞核、胞质和胞膜，用瑞氏或吉姆萨染色后，胞核呈紫红色，胞质为蓝色。疟原虫在人体内先后在肝细胞和红细胞内发育，而目其致病是在红细胞内期裂体增殖时发生的。疟原虫在红细胞内发育包括小滋养体、大滋养体、裂殖体和配子体四个阶段，可通过瑞氏或吉姆萨染色观察其不同时期的不同形态。

疟原虫的病原学检查主要分为厚、薄血膜染色镜检法和血沉棕黄层定量分析法(QBC)。厚血膜中原虫比较集中，易检获，但制片中红细胞容易溶解，原虫形态有所改变，虫种鉴别比较困难;薄血膜中红细胞不易被破坏，疟原虫形态结构较完整、典型，容易识别和鉴别虫种，但原虫密度低时容易漏检，故常采用一张玻片同时制作厚、薄两种血膜，用瑞氏、吉姆萨或吖院橙染色查找疟原虫的存在。QBC分析法的原理是由于感染疟原虫的红细胞比正常红细胞轻，而比白细胞略重，离心分层后，集中分布于正常红细胞层的上部，白细胞层的下部，加入吖院橙试剂后，用荧光显微镜观察结果，敏感度比普通镜检法高很多，更简便、快捷，但费用较高。

疟原虫染色液(吖呢橙染色液)由吖橙和磷酸盐等组成，主要是采用荧光染料吖院橙进行厚薄血膜的染色，通过渗透、吸附和化合等作用与寄生虫或组织细胞的不同成分结合成为带荧光的标本，再经过荧光光源的激发，使结合的荧光素的标本发出荧光，通过荧光显微镜在暗室中观察疟原虫的存在，本法简单、快捷，检出率高于常规法。该试剂仅用于科研领域不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料：

1、蜡笔、甲醇、去离子水

2、载玻片、荧光显微镜、暗室

3、抗荧光淬灭封片剂

操作步骤(仅供参考):

1、制作血膜: 厚血膜比吉姆萨染色的厚血膜略薄，可用 3l 血涂成直径为 1.2~1.5m 的亚厚血膜;薄血膜则不宜过薄，可在涂片时推片以 45°角涂成较厚的薄血膜

2、配制吖橙染色液:0.1ml 吖橙存液加入 9.9ml磷酸盐缓冲液混合即成，可于 4C保存10~15 天。

3、染色前，先用蜡笔在厚薄血膜间划一条横线

4、用 0.5~1ml 甲醇固定薄血膜，清水溶去厚血膜上的血红蛋白

5、吸取吖橙染色液滴加到血膜上，室温避光染色 30s~120s，加盖玻片6、荧光显微镜(激发滤光片波长 488nm ,阻断滤光片波长 515nm) 暗室中观察数并拍照不能及时观察的可用抗荧光灭封片剂封片，可延缓荧光的淬灭

染色结果

疟原虫和白细胞的核呈现黄绿色荧光，胞浆呈橘红色荧光

注意事项

1、涂制血膜用的载玻片使用前需经铬酸洗液处理

2、染色用的血膜厚薄应符合要求.

3、吖橙染色液一般建议临用前稀释，不宜存放过久

4、滴加染色液应以覆盖血膜为准

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

有效期 :12 个月有效。常温运输，4保存。

疟原虫染色液(吖淀橙)