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2018-04-10前列腺酸性磷酸酶(PACP)测定试剂盒
(比色法)
一、测定原理:
酸性磷酸酶 ACP 催化α-萘酚磷酸盐水解,产生α-萘
酚和无机磷酸盐;α-萘酚与重氮盐反应生成有色偶氮化
合物,在 530nm 处比色测定,通过计算可测出酶的活力。
ACP 分成可被酒石酸抑制的 ACP 及不被酒石酸抑制的
ACP(非 PACP),同一份样本若用含酒石酸与不含酒石
酸的两种底物测定,二者测定值之差代表前列腺 ACP
(PACP)的活力。
二、试剂组成与配制:(50T/25 样)
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存 3 个月,若出现结晶
加热溶解即可。
试剂二:贮备液 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二应用液的配制:按贮备液︰双蒸水=1︰9 的比例
进行配制,配好后 4℃保存。
试剂三:粉剂×1 支,用时每支粉剂加试剂二应用液
60mL,4℃保存。
试剂四:粉剂×1 支,4 号稀释液 60mL×1 瓶,用时 1 支
粉剂加 60mL 4 号稀释液,配成 4 号应用液。
4 号应用液 4℃避光保存。
试剂五:液体 60mL×1 瓶,室温保存。
三、操作步骤:
1、样本前处理:
①、血清(浆)样本:血清(浆)直接加样,样本 4℃
存放当天检测,如来不及可-20℃以下
冷冻保存,温度越低存放时间越长。(采血
时必须避免溶血)
②、组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体
积(mL)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的
生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,制成
10%的匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,
取上清液进行测定
四、计算与举例:
前列腺酸性磷酸酶(PACP)测定试剂盒